人脐静脉内皮细胞（永生化）；HUVEC-SV40T+RFP

产品信息：

HUVEC-SV40T+RFP是通过SV40T转化并带RFP荧光标记的人脐静脉内皮细胞，贴壁生长、内皮细胞样形态，培养需内皮专用体系，传代比例1:2，对消化和贴壁较敏感。

细胞背景与特性

来源与形态：取自人脐静脉组织经SV40T转化，带RFP荧光标记，内皮细胞样，贴壁生长。

应用与限制：用于血管生物学、肿瘤等研究，建议尽早完成实验，永生化后至少可稳定传代20代以上。

培养操作

培养基与条件：内皮细胞培养体系，37℃、5% CO、95%空气。

传代步骤：

吸净旧培养基，用常温PBS润洗1-2次。

加0.25%胰酶或0.05%胰酶-EDTA消化1-2分钟（显微镜下观察变圆、间隙变大时终止）。

轻柔吹打成单细胞悬液，离心（1000rpm，3min），弃上清，用新鲜培养基重悬，按1:2比例分瓶（如T25瓶加10mL），十字法混匀后继续培养。

复苏与冻存：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液，重悬接种；冻存用92%FBS+8%DMSO或92%完全培养基+8%DMSO，程序性冻存液配合程序性冻存盒使用。

收到细胞后的处理与注意事项

处理步骤：75%酒精消毒瓶身，37℃培养箱静置2-4小时稳定状态，镜下观察密度：若<80%可加6-8ml完全培养基继续培养，若>80%可直接传代。

注意事项：贴壁较弱，避免运输低温/震荡或试剂过冷导致细胞回缩；消化极度敏感，需精细控制消化时间与吹打力度；培养需专用内皮体系，严格无菌操作，仅限科研使用。

细胞类型与特性：

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。

功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织

不同类型细胞的特异性（生物特性差异）

形态多样性：细胞形态因功能而异，如成纤维细胞呈梭形或多角形，神经细胞有突起，上皮细胞呈多边形紧密排列；细菌细胞多为球形、杆状或螺旋形。

功能特异性：动物细胞依赖线粒体供能，植物细胞具叶绿体进行光合作用；原核细胞（如细菌）无细胞核，真核细胞（如动植物细胞）有核膜包裹的核；某些细胞如酵母细胞可进行出芽生殖，哺乳动物细胞则通过有丝分裂增殖。

生长特性：贴壁细胞需附着表面生长（如成纤维细胞），悬浮细胞可在培养液中自由生长（如血液细胞）；不同细胞分裂速度各异，如肿瘤细胞增殖较快，正常体细胞分裂较慢。

特殊细胞的生物特性举例

成纤维细胞：具丰富粗面内质网、高尔基体，能合成胶原纤维、弹性纤维及有机基质；在外伤刺激下可恢复幼稚状态，参与组织修复。

肿瘤细胞：具无限增殖、贴壁依赖或悬浮生长、易转化等特性，常用于药物筛选与癌变机制研究。

神经干细胞：具多向分化潜能（可分化为神经元、星形胶质细胞等），增殖能力强，在体外培养中可形成克隆球。

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