3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)测定试剂盒/微量法/96S 新品

3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)测定试剂盒/微量法/96S

测定意义：

3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的关键酶，广泛存在于动植物和微生物体内，催化 1，3-二磷酸甘油酸转变为 3-磷酸甘油酸，产生 1 分子 ATP，具有影响 DNA 复制和修补及刺激病毒 RNA 合成等生物学功能，广泛应用于药物靶标设计。

测定原理：

3-磷酸甘油酸激酶催化 3-磷酸甘油酸和 ATP 产生 1,3-二磷酸甘油酸和 ADP，1,3-二磷酸甘油酸在 3-磷酸甘油醛脱氢酶和 NADH 作用下产生 3-磷酸甘油醛、NAD 和磷酸，340nm 处的吸光度变化反映了 3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。

自备实验用品及仪器：

天平、低温离心机、研钵、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板。

测定操作：

1. 分光光度计/酶标仪预热30min ，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。

2. 取微量石英比色皿/96 孔板，依次加入 100μL 试剂一，20μ L 试剂二，10μ L 试剂三，10μ L 试剂四，40μ L试剂五，20μ L 粗酶液，充分混匀，记录 340nm 处 10s 的吸光值 A1 和 310s 的吸光值 A2，△A=A1-A2。

注 意：

正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。