3磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)测试盒 新品

商品属性：

测定意义：

GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸，是糖酵解途径的关键酶，与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关，在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。

测定原理

3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、无机磷和NAD，340nm处测定NADH的减少量可反映GADPH活性的高低。

需自备的仪器和用品

分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

GAPDH测试盒主要分类：

1、比色法测试盒‌

通过测定在450 nm处吸光度的变化来反映GAPDH活性，操作简便、适合高通量检测。

‌2、紫外分光光度法测试盒‌

利用340 nm处NADH的消耗量间接计算GAPDH活性，具有较高灵敏度和准确性。

‌3、ELISA试剂盒‌

用于定量检测特定物种（如人、兔）中的GAPDH蛋白含量，采用双抗体夹心法，检测范围广、特异性强。

4、微量法测试盒

适用于小样本量检测，常用于植物或微生物样本分析，100管/96样规格产品，具备操作简单、保存方便等特点。

试剂组成：

| 试剂名称 | 规格（25T/50T） | 保存条件 |

|-|-||

| 提取液 | 液体30 mL/60 mL | 4℃保存 |

| 试剂一（粉剂） | 1瓶 | -20℃保存 |

| 试剂二（液体） | 25 mL/50 mL | 4℃保存 |

| 试剂三（液体） | 15 μL/30 μL | 4℃保存 |

样本处理：

组织样本：

称取0.1 g组织，加入1 mL提取液，冰浴匀浆后超声破碎（200 W，3 s/次，间隔7 s，总1 min）。

4℃下8000 g离心20 min，取上清置冰上待测。

细胞或细菌：

收集细胞后弃上清，按10⁴个细胞/mL比例加入提取液，超声破碎（同上）。

4℃下8000 g离心10 min，取上清。

血清/血浆：

直接使用，无需处理；若需保存，-20℃冷冻。

操作步骤：

工作液配制：

将试剂二全部倒入试剂一中溶解，37℃预热10 min（哺乳动物样本）或25℃（其他物种）。

加样反应：

取适量工作液于比色皿，加入待测样本，启动反应。

记录340 nm处吸光度变化（2–5 min内）。

空白对照：

设置不含样本的空白管，校正背景干扰（ΔA≤0.01）。

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