HACAT+LUC人永生化表皮细胞荧光素酶标记

HACAT+LUC人永生化表皮细胞荧光素酶标记

商品属性

产品概述

本产品为永生化人表皮细胞系（HaCat）经慢病毒转染稳定表达荧光素酶（Luciferase, LUC）的工程化细胞，适用于肿瘤微环境研究、药物筛选、活体成像等科研用途。细胞源自62岁黑色素瘤患者病灶外围正常，经STR鉴定确认来源，表达角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白及中间丝相关蛋白。

细胞特性

来源：正常表皮组织，上皮细胞样形态，贴壁生长。

标记基因：通过慢病毒转染携带Luc基因，荧光强度随传代次数增加可能减弱，建议定期用嘌呤霉素筛选维持表达。

规格：

冻存管包装：1 mL冻存液，含细胞数>1×10^6。

T25培养瓶：复苏后活细胞常温运输。

用途：仅供科研使用，不可用于临床诊断或治疗。

运输与保存

冻存细胞：干冰运输，接收后立即转入-80℃冰箱（过夜后移至液氮）或直接复苏。若发现干冰挥发、管体破损或污染，需及时联系。

活细胞：T25瓶常温运输，接收后75%酒精消毒瓶壁，置于37℃培养箱静置2-3小时，观察贴壁情况。

细胞接收处理流程

初步检查：显微镜下（4×或5×物镜）确认细胞状态，拍摄10×、20×显微照片及培养瓶外观留存。

贴壁细胞处理：

若细胞密度<60%，去除原培养基（离心回收悬浮细胞），更换新鲜培养基继续培养。

若细胞脱落成团，离心后重悬接种至新瓶。

污染处理：如发现污染或培养液异常，需立即终止实验并联系技术支持。

荧光素酶表达维持（筛选建议）

传代要求：建议至少传3代后冻存备份，再进行嘌呤霉素筛选。

筛选步骤：

初始浓度：1 μg/mL嘌呤霉素完全培养基，观察细胞漂浮情况。

逐步递增：若无明显漂浮，可提高至2 μg/mL，最终不超过5 μg/mL。

终止条件：若漂浮细胞>60%，暂停筛选并更换正常培养基；若细胞在5 μg/mL下正常增殖，可停止筛选。

注意事项

稳定性：长期传代可能导致Luc基因表达下降，建议定期检测荧光强度。

培养基：首次传代需更换含双抗的新鲜培养基，冻存后培养基可省略抗生素。
公司正在出售的产品