HACAT+LUC人永生化表皮细胞荧光素酶标记

细胞属性：

该细胞源自一位62岁患有黑色素瘤男性的病灶外围正常皮肤，角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白、中间丝相关蛋白阳性。

该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。

细胞特性

1） 来源：正常表皮组织

2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

1细胞背景

母细胞系：HaCaT（人永生化角质形成细胞，非肿瘤性）

来源：成人皮肤，自发永生化（非病毒转导）

特点：保留正常表皮细胞分化能力，常用于皮肤生物学、伤口愈合及癌变研究

荧光素酶标记：

通过慢病毒/质粒转萤火虫荧光素酶（FireflLuciferase基因

稳定表达LUC蛋白，可用D-荧光素（D-Luciferin）检测生物发光信号

2培养条件

参数  推荐条件

培养基  DMEM（高糖）

血清  10胎牛血清（FBS）

抗生素  1青霉素-链霉素（可选）

抗性筛选  根据载体选择（如嘌呤霉素）

培养环境  37°C5CO

传代比例  1:1:6（80汇合时）

注意事项：

定期检荧光素酶活性（避免传代过多导致信号衰减）

建议冻存早期代次（≤P20）以保证标记稳定性

3主要应用

（1）皮肤癌与炎症模型

鳞状细胞癌（SCC）研究：结合致癌基因（如RAS突变）构建侵袭模型

银屑病/皮炎机制：研究促炎因子（如IL-17/IL-23）对表皮增生的影响

（2）活体成像（IVIS）

皮下成瘤实验：

接种HaCaT-LUC细胞至裸鼠皮下（5×10/只）

腹腔注射D-荧光素（15mg/kg），min后成像

定量肿瘤生长曲线（总光子通量）

皮肤转移模型：通过尾静脉注射模拟远端转移

（3）药物筛选

抗增殖药物测试（如5-氟尿嘧啶）

抗氧化/光保护剂评估（如紫外线损伤修复实验）

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