大鼠B7-H1/PD-L1elisa试剂盒

商品属性

检测原理

采用双抗体夹心法酶联免疫吸附技术（ELISA）。微孔板预包被抗大鼠B7-H1/PD-L1抗体，加入待测样本或标准品后，与生物素标记的检测抗体形成复合物。洗涤后加入HRP标记的链霉亲和素，通过底物TMB显色反应（蓝色→黄色），在450 nm波长下测定吸光度（OD值），样本浓度与OD值呈正相关。

试剂盒组成

| 组分 | 96T配置 | 48T配置 | 保存条件 |

| 预包被微孔板 | 1×96孔 | 1×48孔 | 2-8℃干燥 |

| B7-H1/PD-L1标准品 | 40 μg/mL（0.6 mL）| 40 μg/mL（0.3 mL）| -20℃（稀释后勿冻存）|

| 生物素标记抗体 | 6 mL | 3 mL | 2-8℃ |

| HRP-链霉亲和素 | 10 mL | 5 mL | 2-8℃避光 |

| 洗涤缓冲液（20×） | 20 mL | 10 mL | 2-8℃（现用现稀释）|

| 底物A/B液 | 各6 mL | 各3 mL | 2-8℃避光 |

| 终止液 | 6 mL | 3 mL | 2-8℃ |

| 样本稀释液 | 12 mL | 6 mL | 2-8℃ |

样本要求

类型：血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、细胞上清液或组织匀浆。

处理：

血清/血浆：采集后2小时内离心（3000×g，10分钟），-20℃分装保存，避免反复冻融。

组织匀浆：按1:9（w/v）加入PBS匀浆后离心取上清。

禁用：含NaN₃或溶血样本（干扰HRP活性）。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释（建议范围：5-1000 pg/mL）。

加样：每孔加入50 μL标准品或样本，37℃孵育30分钟。

洗涤：弃液后加满洗涤液，静置30秒，重复5次。

显色：依次加入底物A/B各50 μL，避光反应15分钟。

终止：加入50 μL终止液，15分钟内测定OD450值。

注意事项

试剂使用前需平衡至室温，避免交叉污染。

不同批号组分不可混用，开封后需密封保存。

终止液为酸性溶液，接触后立即用水冲洗。

计算与分析

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制曲线，通过四参数拟合方程计算样本浓度。

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