人巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)ELISA试剂盒

产品用途

本试剂盒用于定量检测人血清、血浆及相关液体样本中巨噬细胞炎性蛋白1α（MIP-1α）的浓度，适用于科研实验，不适用于临床诊断。

实验原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。微孔板预包被抗人MIP-1α抗体，样本中的MIP-1α与固相抗体结合后，依次加入生物素标记的检测抗体和辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素，形成复合物。加入底物TMB显色，终止反应后测定450 nm波长下的吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板：96孔或48孔配置（根据规格选择）。

标准品：浓度800 pg/mL，需按说明书稀释。

检测抗体：生物素标记的抗MIP-1α抗体。

酶结合物：HRP标记的链霉亲和素。

显色底物（TMB）：A液、B液。

终止液：酸性溶液。

洗涤缓冲液：浓缩液，需稀释使用。

封板膜：即用型。

样本要求

样本类型：血清、血浆（EDTA或肝素抗凝）。

保存条件：2-8℃短期保存，-20℃长期保存，避免反复冻融。

操作步骤

标准品稀释：按梯度稀释至目标浓度。

加样：每孔加入样本或标准品，孵育后洗涤。

抗体结合：加入生物素标记抗体，孵育洗涤。

酶反应：加入HRP-亲和素，孵育洗涤。

显色：加入TMB底物，避光反应后终止。

检测：酶标仪读取450 nm OD值。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过曲线方程计算样本浓度。

性能参数

灵敏度：通常＜5 pg/mL。

检测范围：15-800 pg/mL（具体以实际标准曲线为准）。

特异性：与人MIP-1β、CCL5等无交叉反应。

注意事项

试剂盒需2-8℃保存，使用前平衡至室温。

避免底物接触金属离子或氧化剂。

不同批号试剂不可混用。

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