大鼠sTNFR2/TNFRS1Belisa试剂盒

                                             大鼠sTNFR2/TNFRS1Belisa试剂盒
试剂盒基本信息

检测目标：大鼠可溶性肿瘤坏死因子受体2（sTNFR2/TNFRSF1B）

生物学作用：sTNFR2是TNF-α的天然拮抗剂，调节炎症反应，与自身免疫病、代谢综合征等相关。

检测方法：双抗体夹心ELISA（酶联免疫吸附试验）

 样本类型：

血清（推荐）

血浆（EDTA/肝素抗凝）

细胞培养上清（如巨噬细胞、脂肪细胞）

灵敏度：通常 ≤5 pg/mL（高灵敏度检测低丰度样本）

检测范围：15–2000 pg/mL（覆盖生理及病理浓度）

特异性：特异性识别大鼠sTNFR2，与人、小鼠TNFR2交叉反应低（需确认说明书）。

二、实验原理

捕获抗体：微孔板预包被抗大鼠sTNFR2单抗，结合样本中的sTNFR。

检测抗体：加入生物素化或HRP标记的二抗，形成“抗体-抗原-抗体”复合物。

信号放大：链霉亲和素-HRP催化TMB显色（蓝色→黄色）。

定量分析：450 nm测OD值，标准曲线计算sTNFR2浓度。

三、试剂盒核心组分

组分  说明

预包被96孔板  抗大鼠sTNFR2抗体固定化

sTNFR2标准品  重组大鼠sTNFR2（冻干粉，需复溶）

HRP标记检测抗体  生物素化或直接酶标

TMB显色液  避光保存，现用现配

终止液（2M HSO）  终止反应，稳定颜色

洗涤缓冲液（20×）  PBS含Tween-20，需稀释使用

四、操作流程（简化版）

标准品制备：梯度稀释（0、15、50、200、800、2000 pg/mL）。

加样孵育：样本/标准品加入孔中，37℃孵育1–2小时。

洗涤：洗板3–5次（避免残留）。

二抗孵育：加入HRP标记抗体，37℃孵育1小时。

显色：加TMB避光反应10–15分钟。

终止与检测：加终止液，15分钟内测OD450 nm。

五、典型应用场景

炎症与免疫研究：

评估类风湿性关节炎（RA）、炎症性肠病（IBD）模型中的sTNFR2水平。

代谢疾病：

研究肥胖、胰岛素抵抗中TNF-α/sTNFR2的调控关系。

神经退行性疾病：

检测阿尔茨海默病、多发性硬化模型中神经炎症标志物。

六、关键注意事项

样本处理：

血清/血浆采集后需尽快分离（2小时内离心，避免反复冻融）。

细胞培养上清需去除碎片（0.22 μm过滤或离心）。

实验优化：

高浓度样本需稀释后检测，避免超出标准曲线范围。

数据可靠性：

建议复孔检测，CV值<10%。

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