小鼠sTNFR2/TNFRS1Belisa试剂盒

产品概述

本试剂盒用于定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的可溶性肿瘤坏死因子受体2(sTNFR2/TNFRSF1B)水平。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)原理，具有高灵敏度、高特异性和良好的重复性。

产品信息

规格: 96孔板

检测范围: 15.6-1000 pg/mL

灵敏度: <5 pg/mL

样本类型: 血清、血浆、细胞培养上清液

保存条件: 2-8°C保存，有效期12个月

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。将抗小鼠sTNFR2抗体预包被在微孔板上，加入标准品或样本后，其中的sTNFR2会与固相抗体结合。洗涤后加入生物素标记的检测抗体，形成抗体-抗原-抗体复合物。随后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素，最后加入TMB底物显色。颜色的深浅与样本中sTNFR2的浓度成正比。

试剂盒组成

| 组分 | 规格 | 数量 |

| 预包被微孔板 | 96孔 | 1块 |

| sTNFR2标准品 | 冻干粉 | 2瓶 |

| 标准品稀释液 | 10mL | 1瓶 |

| 生物素标记抗体 | 120μL | 1管 |

| 抗体稀释液 | 10mL | 1瓶 |

| HRP-链霉亲和素 | 120μL | 1管 |

| TMB底物 | 10mL | 1瓶 |

| 终止液 | 10mL | 1瓶 |

| 洗涤液(20×) | 30mL | 1瓶 |

| 封板膜 | - | 4张 |

样本收集与处理

血清: 室温血液自然凝固10-20分钟，2000×g离心20分钟取上清

血浆: EDTA或肝素抗凝，2000×g离心20分钟取上清

细胞培养上清: 2000×g离心20分钟去除颗粒物

保存: 样本可分装后-20°C保存，避免反复冻融

操作步骤

标准品准备: 用标准品稀释液复溶标准品，按说明书进行系列稀释

加样: 分别加入标准品和样本100μL至相应孔中，37°C孵育90分钟

洗涤: 弃去液体，每孔加入洗涤液300μL，静置30秒后弃去，重复4次

加检测抗体: 每孔加入100μL生物素标记抗体，37°C孵育60分钟

洗涤: 同步骤3

加酶结合物: 每孔加入100μL HRP-链霉亲和素，37°C孵育30分钟

洗涤: 同步骤3

显色: 每孔加入90μL TMB底物，37°C避光显色15-30分钟

终止: 每孔加入50μL终止液

检测: 450nm波长读取OD值(参考波长630nm)

结果计算

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线

根据样本OD值在标准曲线上查出对应浓度

若样本稀释过，需乘以稀释倍数

性能参数

精密度: 板内变异系数<10%，板间变异系数<15%

回收率: 85%-115%

特异性: 不与小鼠其他TNF受体家族成员交叉反应

稳定性: 开封后试剂在2-8°C保存1个月内稳定

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