大鼠sTNFR2/TNFRS1Belisa试剂盒

产品概述

大鼠可溶性肿瘤坏死因子受体2(sTNFR2/TNFRSF1B)ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测大鼠血清、血浆、细胞培养上清液或其他生物液体中sTNFR2/TNFRSF1B含量的酶联免疫吸附测定试剂盒。

产品信息

英文名称：Rat sTNFR2/TNFRSF1B ELISA Kit

检测方法：双抗体夹心法

检测范围：通常为15.6-1000 pg/mL

灵敏度：通常<5 pg/mL

样本类型：血清、血浆、细胞培养上清液

样本体积：100 μL/孔

检测时间：约4-5小时（包括孵育时间）

保存条件：2-8°C（未开封试剂盒）

主要组成成分

预包被板：96孔微孔板，包被有大鼠sTNFR2/TNFRSF1B特异性抗体

标准品：重组大鼠sTNFR2/TNFRSF1B蛋白（冻干粉或溶液）

检测抗体：生物素标记的大鼠sTNFR2/TNFRSF1B抗体

HRP标记链霉亲和素

TMB底物溶液

终止液（通常为1M或2M硫酸溶液）

洗涤缓冲液（20-25×浓缩液）

样本稀释液

封板膜

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。将大鼠sTNFR2/TNFRSF1B特异性抗体预包被于微孔板上，加入标准品或样本后，其中的sTNFR2/TNFRSF1B会与包被抗体结合。洗板后加入生物素标记的检测抗体，形成抗体-抗原-抗体复合物。再加入HRP标记的链霉亲和素，与生物素结合。最后加入TMB底物显色，颜色的深浅与样本中sTNFR2/TNFRSF1B的浓度成正比。

操作步骤

准备试剂：将所有试剂平衡至室温（18-25°C），配制所需溶液

标准品稀释：用样本稀释液将标准品按说明书梯度稀释

加样：分别加入标准品和待测样本100μL/孔

孵育：37°C孵育90分钟

洗涤：弃去液体，用洗涤液洗板4-5次

加检测抗体：每孔加入100μL生物素标记抗体，37°C孵育60分钟

洗涤：同上

加酶结合物：每孔加入100μL HRP标记链霉亲和素，37°C孵育30分钟

洗涤：同上

显色：每孔加入90μL TMB底物，37°C避光显色15-30分钟

终止反应：每孔加入50μL终止液

读数：在450nm波长下测定各孔OD值（建议在30分钟内完成）

结果计算

计算标准品和样本的平均OD值

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线

根据样本OD值，从标准曲线上查出相应浓度

若样本被稀释，需乘以稀释倍数

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