NR8383大鼠肺泡巨噬细胞 新品

                                                            NR8383大鼠肺泡巨噬细胞
产品信息：

种属:大鼠

生长特性:半贴半悬

细胞形态:巨噬细胞样

冻存条件:冻存液：90% FBS+10% DMSO

温度：液氮

培养方案A（默认）:生长培养基：Ham's F-12K+20% FBS +1% P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO₂，5%, 温度：37℃

推荐传代比例:2×10⁵-5×10⁵ cells/mL

推荐换液频率:2-3次/周

参考资料(来源文献)

背景描述:NR8383细胞来源于肺灌洗时的正常大鼠肺泡巨噬细胞，NR8383细胞在Gerbil肺细胞连续培养液存在下培养了8-9个月。随后，NR8383细胞不再需要外源生长因子。通过有限稀释法，从单个细胞克隆并亚克隆NR8383细胞，并3次用软琼脂亚克隆。NR8383细胞表现出巨噬细胞的特性：吞噬酵母多糖和铜绿、非特异性脂酶活性、Fc受体、氧化降解；分泌IL-1、TNF beta和IL-6，可重复地响应外源生长因子。NR8383细胞响应博莱霉素，分泌TGF beta前体。NR8383细胞在博莱霉素刺激下，TGF beta mRNA表达也上升。NR8383细胞对内毒素敏感，1-10 ng/mL的LPS水平抑制增生达50%。即使达到0.001 mg/mL的水平，LPS抑制还是无毒且在后续过程中可逆的。NR8383细胞提供了高响应的肺泡巨噬细胞的均一来源，可以用于体外研究巨噬细胞相关活性，此细胞悬浮-贴壁混合生长。

年龄（性别）:Adult;Male

组织来源:肺；巨噬细胞；肺泡

细胞类型:自发永生化细胞

生物安全等级:BSL-1

基因表达情况:transforming growth factor beta (TGF beta); interleukin 1 (IL-1); interleukin 6 (IL-6)

受体表达情况:Fc

保藏机构:ATCC; CRL-2192

培养基体系：主流使用F12K+15-20%胎牛血清+1%双抗

培养环境：37℃，5% CO2，饱和湿度

生长特性：半悬浮混合生长，需同时处理悬浮和贴壁细胞

详细操作流程

复苏操作：

将冻存管37℃水浴快速解冻，转移至含5-6ml完全培养基的离心管中，1000RPM离心5分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬，接种至培养瓶中37℃培养过夜

传代方法：

收集细胞：轻柔吹打收集悬浮细胞，PBS润洗贴壁细胞

消化处理：0.25%胰酶-EDTA消化1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落

离心重悬：1000RPM离心8-10分钟，弃上清，新鲜培养基重悬

分瓶比例：按1:2至1:5比例分瓶，补足培养基继续培养

冻存方案：

推荐冻存液配方为90%胎牛血清+10%DMSO，细胞密度1-3×10?/ml，程序降温后转移至液氮保存

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