NCIH2087人非小细胞肺癌细胞

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:69岁，白人男性

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI1640 +5% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

1. 细胞核心特性

分子病理特征

组织来源：源自肺腺癌患者的原发肿瘤组织，病理分型为 实体型腺癌伴肉瘤样分化（含上皮-间质双向标记）

驱动变异：

EGFR L858R敏感突变（占比＞90%），罕见共存MET扩增（约5%细胞亚群）

耐药相关突变：TP53 Y220C + CTNNB1 S37F（Wnt/β-catenin通路激活）

免疫特征：

PD-L1表达中等（TPS 20-30%）

高分泌VEGF（＞500pg/mL/24h）促进血管生成

2. 核心科研应用

转化医学方向

靶向治疗研究：

三代EGFR-TKI（奥希替尼）敏感性模型（IC50 1-3nM）

耐药机制：可诱导EGFR C797S顺式突变或MET过表达

微环境研究：

与癌症相关成纤维细胞（CAFs）共培养促进IL-6分泌（ELISA验证）

适用于抗血管生成药物（贝伐珠单抗）联合治疗测试

技术适配性

单细胞分析：已建立scRNA-seq追踪EGFR突变亚克隆

类器官培养：气液界面（ALI）培养可形成腺泡-实体混合结构

3. 培养体系优化

定制化培养方案

培养基配方：

 DMEM/F12 (3:1) + 10% 特级胎牛血清（需预筛选支持EGFR信号）

关键添加物：

- 重组人EGF（10ng/mL）

- 胰岛素（5μg/mL）

- A83-01（1μM，抑制自发分化）

特殊条件：

 传代时保留条件培养基（比例1:1）

 建议使用胶原IV包被培养瓶

质控标准

检测项  方法  合格阈值

EGFR突变稳定性  ddPCR（L858R）  突变频率≥85%

支原体污染  PCR-电泳双验证  条带阴性

细胞活力  Calcein-AM/PI双染  存活率＞90%

4. 常见问题解决方案

问题：奥希替尼敏感性下降

→ 优化：冻存早期代次（P10前），避免长期培养导致遗传漂变

问题：类实体结构过多

→ 调整：ALI培养时添加10μM ROCK抑制剂（Y-27632）

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