产品名称:小鼠乳腺癌细胞+LUC4T1/LUC
传代方法 | 次建议1:2传代 | 冻存条件 | 无血清冻存液(货号:C7001) |
细胞描述 | 本库的细胞仅用于科研工作,未经许可不得用于其他目的,使用者不得将本库细胞转让给第三者。 |
培养备注 | 用无菌离心管收集瓶子培养基,留作过渡培养 |
小鼠乳腺癌细胞+LUC4T1/LUC到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,培养箱静置2-4小时。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。(注意发货的是密封培养瓶的话,放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松,传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基,另外一瓶用自己配的完全培养基)
小鼠乳腺癌细胞+LUC4T1/LUC培养步骤
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
三、细胞冻存:(注:无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司官网货号:C7001)
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、用适量的冻存液重悬细胞,并放置于冻存管中;
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃
小鼠乳腺癌细胞+LUC4T1/LUC部分相关细胞如下:
YS1795 OKT11 小鼠杂交瘤(抗CD2)细胞OKT11
YS1796 SDOW17 小鼠杂交瘤SDOW17
YS1797 PT67 小鼠源基于MLV-10A1逆转录病毒包装细胞系PT67
YS1798 BAF3 小鼠原B细胞株BAF3
YS1799 PAN02/LUC 小鼠胰腺癌细胞/胰腺导管癌+LUCPAN02/LUC
YS1800 PAN02 小鼠胰腺癌细胞/胰腺导管癌PAN02
YS1801 LTPA 小鼠胰腺癌细胞LTPA
YS1802 BetaTC6 小鼠胰岛素瘤胰岛Beta细胞BetaTC6
YS1803 MS1 小鼠胰岛内皮细胞MS1
YS1804 HL1 小鼠心肌细胞HL1
YS1805 BV2 小鼠小胶质细胞BV2
YS1806 STC1 小鼠小肠内分泌细胞STC1
YS1807 RGC5 小鼠视网膜神经节细胞RGC5
YS1808 MPC5 小鼠肾足细胞MPC5
YS1809 IMCD3 小鼠肾脏内髓集合管3上皮细胞IMCD3
YS1810 SV40MES13 小鼠肾小球系膜细胞SV40MES13
YS1811 Renca 小鼠肾癌细胞Renca
YS1812 C172 小鼠神经干细胞C17.2
YS1813 HC11 小鼠乳腺上皮细胞HC11
YS1814 HC11MAMMARY 小鼠乳腺上皮细胞HC11MAMMARY
YS1815 4T1/LUC 小鼠乳腺癌细胞+LUC4T1/LUC
YS1816 4T1 小鼠乳腺癌细胞4T1
YS1817 EMT6 小鼠乳腺癌细胞EMT6
YS1818 MA891 小鼠乳腺癌高转移细胞MA891
YS1819 MFC 小鼠前胃癌细胞MFC
YS1820 RM1 小鼠前列腺癌细胞RM1
YS1821 ASMC 小鼠气道平滑肌细胞ASMC
YS1822 Lwnt3a 小鼠皮下结缔组织细胞Lwnt3a
YS1823 NIH3T3 小鼠胚胎细胞NIH3T3
YS1824 ATDC5 小鼠胚胎瘤细胞-软骨细胞ATDC5
YS1825 E14 小鼠胚胎干细胞E14
YS1826 3T3L1 小鼠胚胎成纤维细胞3T3L1
YS1827 BALB3T3cloneA31 小鼠胚胎成纤维细胞BALB3T3cloneA31
YS1828 C3H10T12,Clone8 小鼠胚胎成纤维细胞C3H10T12,Clone8
YS1829 MEF 小鼠胚胎成纤维细胞MEF
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