4T1+luc小鼠乳腺癌细胞荧光素酶标记 新品

商品属性

英文名称：4T1-LUC（或4T1-FLUC-puro）

规格：

1×10^6 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管

可选GFP双标记型号（4T1-LUC-GFP-Puro）

来源：BALB/c小鼠组织

标记特性：稳定表达萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase, FLUC），部分型号联合绿色荧光蛋白（GFP）及嘌呤霉素（Puro）抗性。

细胞特性

形态：上皮细胞样，贴壁生长。

生长培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1%双抗 + 0.5 μg/mL嘌呤霉素（维持筛选压力）。

培养条件：37℃、5% CO₂，湿度饱和环境。

应用：

活体动物成像（如肿瘤生长监测）

荧光素酶报告基因实验阳性对照

转移性机制研究

操作指南

1. 细胞复苏

快速解冻：37℃水浴中轻柔摇晃冻存管（1~2分钟内完成）。

离心去DMSO：1000 rpm离心4分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬。

接种：转移至T25瓶，补足培养基至5mL，轻摇均匀后放入培养箱。

2. 传代培养

汇合度达80%~90%时传代（约每周2~3次）。

消化：0.25%胰酶处理2~3分钟，1:2至1:3比例分瓶。

嘌呤霉素维持：传代后需添加0.5 μg/mL嘌呤霉素以保持标记稳定性。

3. 冻存建议

冻存液：90% FBS + 10% DMSO，细胞密度≥1×10^6 cells/mL。

程序：梯度降温（4℃→-20℃→-80℃→液氮）。

质量控制

纯度：>99.9%（经荧光素酶活性及GFP流式检测）。

无菌检测：支原体、细菌、真菌阴性。

功能验证：通过体内外荧光素酶活性检测（如D-荧光素底物发光实验）。

注意事项

严格避免反复冻融，建议复苏后传代≥2次再用于实验。

若使用GFP双标记细胞，需避光操作以减少荧光淬灭。

活体成像前需确认荧光素酶表达稳定性（建议定期用嘌呤霉素筛选）。

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