4T1+luc小鼠乳腺癌细胞荧光素酶标记

4T1+luc小鼠乳腺癌细胞荧光素酶标记

 基本特性:

4T1 是从410.4瘤株中未经诱变筛得的6-硫鸟嘌噙抗性细胞株。当注射到BALB/c 小鼠中时，4T1自发产生高转移肿瘤，可转移到肺，肝，淋巴结和大脑，同时在注射部位形成始发灶。诱导转移时不需要摘除始发灶。4T1细胞在BALB/c小鼠中的生长与转移特性与人体中的乳腺癌十分相近。这种肿瘤是人VI期乳腺癌的动物模型。

4T1-诱导的肿瘤在手术后及未手术情况下转移的动力学相近，可以用作手术后及未手术模型。 跟其他肿瘤模型相比，由于4T1的抗6-硫鸟嘌噙特性，微小的转移细胞团(少到仅仅1个)也可以在许多远端器官ᓾᓾ

细胞系基础信息

背景与构建：

通过慢病毒或逆转录病毒转染，将荧光素酶（Luciferaseluc）基因稳定整合至4T1细胞基因组中，表达萤火虫荧光素酶（Fireflluciferase）。

常用于活体成像技术（IVIS系统），实时监测肿瘤生长、转移及治疗响应。

特性保留：

保留亲本4T1细胞的高转移性（肺、肝、骨转移）和三阴性乳腺癌（TNBC）特征。

需验证标记后细胞的增殖率、侵袭能力是否与野生型一致（避免基因插入影响表型）。

核心研究应用

活体成像技术（BLI）：

步骤：

注射D-荧光素底物（15mg/kg，腹腔注射）。

10-15分钟后通过IVIS系统检测生物发光信号（单位：光子/秒/cm2/球面度）。

应用场景：

原位移植后纵向监测原发瘤和转移灶（如肺转移的早期检测）。

评估免疫治疗（如PD-1抗体）或化疗药物（紫杉醇）的抑瘤效果。

转移机制研究：

通过荧光信号定量比较不同器官的转移倾向（如CXCR4抑制剂对骨转移的阻断作用）。

实验关键注意事项

细胞培养：

培养基：RPMI-16410FB抗生素（如嘌呤霉素）（维持luc基因选择压力）。

定期检测荧光素酶活性（如使用LuciferasAssaKit），避免信号衰减。

体内实验设计：

小鼠品系：必须使用免疫健全的BALB/c小鼠（同源模型）。

荧光素底物：需避光保存，现配现用（溶解于PBS，过滤除菌）。

成像参数：曝光时间10-60秒，避免信号饱和或背景噪音。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。