L Wnt-3A（小鼠皮下结缔组织细胞）

1.细胞起源：

细胞简称 L Wnt-3A

细胞别称 L-Wnt-3A; L-Wnt3A; LWnt3A; LWnt-3A

细胞背景描述 L Wnt-3A细胞是由L-M(TK-)细胞用Wnt-3A表达载体转染并在含G418的培养基中筛选出的稳转株。Wnt-3A基因编码一个有变异的信号功效分泌性糖蛋白，Wnt基因控制胚胎发过程中的许多模式形成和生长事件。L Wnt-3A细胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白，L Wnt-3A细胞是目前生产Wnt-3A条件培养基的来源。由于这种条件培养基还包含Wnt-3A蛋白外的其他因子，对于涉及Wnt-3A条件培养基的实验有必要用其来源细胞株作对照。

供体年龄 雄性，100日龄

组织来源 组织：皮下结缔组织；疏松结缔组织及脂肪；品系：C3H/An

细胞形态 成纤维细胞样

细胞类型 自发永生化细胞

生长特性 贴壁细胞

生物安全等级 1

2.培养及保藏：

完全培养基 DMEM(PM150210)＋0.4mg/ml G418(PB180125)＋10% FBS(164210-50)＋1% P/S(PB180120)

培养环境 空气，95%；CO ₂，5%

37℃

冻存条件 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

液氮

3.传代方法：

传代步骤

1、吸出原培养液；

2、加入2ml左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃；

3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；

4、放入培养箱消化，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止，全程不要拍打培养瓶；

5、加入3ml含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液；

6、收集细胞悬液离心，1200rpm/min 3分钟，离心完吸出上清丢弃；

7、加入新鲜培养基，吹打几下混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

消化时间 2~3分钟

传代比例（密度） 1:3-1:4

换液频次 2~3次/周

本产品仅供科研使用。不能用于人和动物治疗等其它临床诊断使用！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。