"NCI-H69:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
贴壁细胞冻存注意事项:细胞冻存液需提前配制,不可直接将DMSO加入细胞悬液中;不同细胞消化时间有差异,以实际镜检结果为准,大部分细胞回缩变圆并有少量细胞脱落即可中止消化,消化时间不宜过长;应选择汇合度80%-90%左右,细胞处于对数生长期时进行冻存操作,确保细胞冻存时状态Zui佳,冻存密度可根据细胞性进行调整;冻存细胞保存温度应低于-130℃,不可在-80℃长期保存。贴壁细胞冻存操作步骤:从培养箱中取出准备冻存的细胞;显微镜下观察细胞状态并拍照记录;酒精消毒培养瓶后放入安全柜中;吸去多余的培养基,加人2~3ml(PBS缓冲液)润洗一次;加入1ml胰酶,放入37℃消化;消化1min左右,在显微镜下观察细胞消化情况;消化完全后,加3ml完全培养基终止;将细胞悬液移入15ml离心管中离心,1000rpm/min(约200g)离心3-5min;吸去多余的液体,向细胞沉淀中加入适量的冻存液,轻轻吸打混匀;按比例分装至冻存管中;贴HAO标签后放入梯度冻存盒中;将冻存盒放入-80℃,降温过夜后,移入液氮中保存。贴壁细胞冻存实验准备事项:将15mL离心管、冻存管、PBS缓冲液、移液管、电动移液器等物品提前放入生物安全柜中,紫外照射30min消毒灭菌;细胞完全培养基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、细胞冻存液等从4℃冰箱中取出后,复温至室温,备用;程序降温盒复温至室温备用。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
NGP细胞类似产品::CEM-C1细胞、K299细胞、MRC-9细胞
CESS细胞类似产品::EFM-19细胞、B16 melanoma细胞、CaSki细胞
SNU668细胞类似产品::Malme-3M细胞、H-446细胞、DU 4475细胞
EoL-1细胞类似产品::MEG-01细胞、U-138-MG细胞、C-Li-7细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:详见相关文献介绍
NCI-H69:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
G-361细胞类似产品::U-118MG细胞、U-87MG细胞、HCMEC细胞
DSL6A/C1细胞类似产品::HSC-4细胞、SW 900细胞、LK-2细胞
HFT-8810细胞类似产品::NCI-H1155细胞、TJ905细胞、Capan2细胞
常见培养细胞预防污染的有效措施:体外培养的细胞受到严重污染时,有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此,防止污染,预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终,才能将发生污染的可能性降到Zui小程度。一般预防可从以下几方面着手:1)添加抗生素:各种抗生素性质不同,对各种微生物的作用也不同,联合应用比单用效果HAO,预防性应用比污染后使用HAO(但迄今尚无对抗支原体抗生素)。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性,且对细胞本身也有一定影响,因此为避免诱导抗药细菌,应定期更换培养系统中的抗生素,或尽可能不用抗生素处理;2)从物品、用品消毒灭菌着手:细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时,在无菌过滤操作中,随着滤过体积的增大,滤膜破损的可能性增加,故应选择Zui后过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作:75%的酒精搽拭培养箱后,使用可移动的紫外灯至少消毒30min,加入GAO压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度。也可配制300ml的饱和酸铜加3L灭菌超纯水混合成酸铜溶液加入水槽中。
细胞传代方法:1:2—1:4传代,每周换液2次
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
NCI-H69:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:悬浮生长,聚团
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
3-LL细胞类似产品::CCD 966 SK细胞、SRS-82细胞、SW-954细胞
GM-3573细胞类似产品::CCD18细胞、COLO-394细胞、CCRF-CEM C7细胞
UC-3细胞类似产品::HCFB(HCF)细胞、NCIH650细胞、DH-82细胞
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AtT 20细胞类似产品::HN13细胞、A549/ATCC细胞、MCF7/WT细胞
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NCI-H69:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
NCI-322细胞类似产品::H-2171细胞、H226细胞、NCI-H460细胞
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Panc_05_04细胞类似产品::JIMT1细胞、H2172细胞、McARH7777细胞
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HuH-28细胞类似产品::MCCAR细胞、Hs934T细胞、Jurkat, Clone E6-1细胞
TGHAVSMC细胞类似产品::HCC70细胞、Hs839.T细胞、Raji细胞
MC3T3-E1 Subclone 4细胞类似产品::RCF细胞、H184A1细胞、CAL 148细胞
NCI H295R细胞类似产品::NCI-H1092细胞、RERFLCMS细胞、SUIT2细胞
Hs840_T细胞类似产品::LIXC002细胞、578T细胞、EoL-1 cell细胞
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NCI-SNU-761细胞类似产品::293细胞、KM12细胞、SNU-182细胞
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H1581细胞类似产品::HSC-6细胞、L 132细胞、SPDC-CCL141细胞
C3A细胞类似产品::TCC-SUP细胞、GAK细胞、CII细胞
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NIH-OVCAR-3细胞类似产品::251 MG细胞、Mono-Mac-6细胞、High-5细胞
NCI-H69:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
BE2-C细胞类似产品::HCT/FU细胞、U-2-OS细胞、NCI-841细胞
H1954细胞类似产品::Eca109细胞、HEK-293-FT细胞、EAC细胞
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Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞类似产品::MDA-PCa-2b细胞、HT-22细胞、293FT细胞
RT-4细胞类似产品::CCRFCEM细胞、HPDE6c7细胞、ASH-3细胞
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