上海创赛科技有限公司

名称:O-propargyl-puromycin (OPP) 

品牌: Medlife

CAS号:1416561-90-4

纯度:  ≥98%

货号:PC16427

规格:500μg/价格:¥237.00

规格:1mg/价格:¥338.00

规格:5mg/价格:¥813.00

链接:https://www.med-life.cn/product/705259.html

一、产品简介

O-Propargyl-Puromycin（简称 OPP 或 OP-puro，货号 Click Tag™ O-Propargyl-puromycin）是嘌呤霉素（Puromycin）的炔基（alkyne）类似物，是一种用于非放射性、生物正交标记新生（nascent）蛋白质的合成工具化合物。本品以白色至类白色结晶性固体供应，纯度 ≥98%（HPLC），结构明确、批次一致，是生命科学与医学研究中检测、定量与亲和纯化新合成蛋白质的核心 Click Chemistry 试剂。

在化学本质上，OPP 保留了嘌呤霉素的核糖体结合药效团（可进入核糖体 A 位、共价插入延伸中多肽链 C 端并提前终止翻译），同时在分子末端引入炔丙基（propargyl）官能团。该炔基可在铜(I)催化叠氮-炔环加成（CuAAC）反应中，与叠氮修饰的荧光染料（如 Alexa Fluor-azide）或亲和标签（如 Biotin-azide）特异性、正交地偶联，从而将"翻译终止"与"可视化/富集"两步解耦。本品在兔网织红细胞裂解物与 HEK293T 细胞中 1–25 μM 浓度范围即可有效抑制蛋白合成，且对未修饰嘌呤霉素的翻译抑制效力仅低 2–3 倍，可在短期标记中较好保留细胞活力。

本品广泛应用于翻译调控研究、神经科学、肿瘤生物学、干细胞与发育生物学、免疫代谢、以及蛋白合成抑制剂药效评价等前沿领域。产品密封、避光、-20℃ 冷冻保存，防潮、防高温、防氧化；规范储存条件下粉末稳定期可达 24 个月。需特别说明：本品仅限体外科研与实验动物研究使用，严禁用于人体或兽药用途。

二、作用机制

1、核糖体 A 位竞争与翻译提前终止机制 OPP 继承嘌呤霉素的经典作用模式：作为氨基核苷类抗生素类似物，被核糖体识别并进入 A 位，与延伸中的多肽链形成共价肽酰-OPP 加合物，导致肽链从核糖体提前脱落、翻译终止。由此，正在合成的蛋白质在其 C 端被"封端"上 OPP 标签——这是后续检测的前提。

2、末端炔基的生物正交点击化学机制 区别于嘌呤霉素，OPP 末端携带炔丙基，可在 CuAAC（铜催化的叠氮-炔环加成）条件下与叠氮化荧光团或生物素高效、特异偶联，生成稳定的三唑连接。该反应在复杂生物体系中背景极低、选择性高，使新合成蛋白得以被荧光成像、流式分选或链霉亲和素富集，且无需放射性同位素、无需遗传改造。

3、完整培养基兼容机制（非甲硫氨酸饥饿） 传统非放射性标记依赖甲硫氨酸类似物（AHA、HPG），须使用无甲硫氨酸培养基以免内源竞争，这会改变细胞生理状态。OPP 直接耦合翻译终止事件，在含甲硫氨酸的完整培养基中即可标记，避免了饥饿应激对蛋白合成速率的干扰，更贴近生理真实状态。

4、活细胞渗透与在体标记机制 OPP 具有细胞渗透性，可进入培养的多种细胞（如骨髓瘤、胰岛、生精细胞）以及整体生物（小鼠、非洲爪蟾、果蝇、斑马鱼等），在 C 端掺入翻译中多肽并终止延伸。其产物（截短 C 端炔基标记蛋白）可被蛋白酶体快速周转，因而信号反映的是"近期翻译活性"，适合动态监测。

5、双轨检测与组学兼容机制 经 CuAAC 引入不同叠氮标签后，OPP 可走两条互补路线：① 荧光标签 → 显微镜/高内涵成像，揭示蛋白合成亚细胞分布；② 生物素标签 → 链霉亲和素珠 pull-down，结合 LC-MS/MS 实现全蛋白质组水平新生肽段定量。这种"成像 + 组学"双轨能力，使其成为从单分子定位到系统水平翻译调控研究的通用探针。

三、主要应用领域

1、翻译调控与细胞生长研究 OPP 可定量细胞/组织的全局翻译速率，是研究 mTOR、4E-BP1、eIF 等翻译调控通路的核心工具。例如造血干细胞研究（Signer et al., Nature 2014）即借助 OPP 揭示其需要高度受控的蛋白合成速率；亦用于评价营养素、应激、生长因子对整体翻译的影响。

2、神经科学与神经退行性疾病 在非洲爪蟾脊髓神经元中，OPP 信号在突触接触位点显著富集，证实 Agrin 经 mTOR/4E-BP1 通路局部激活翻译（Yu et al., Development 2021）。OPP 广泛用于神经元局部蛋白合成、突触可塑性与阿尔茨海默病、帕金森病等神经退行模型中翻译失衡的机制解析。

3、肿瘤生物学与肿瘤治疗评价 OPP 用于肿瘤细胞的翻译重编程研究，亦作为蛋白合成抑制剂药效指标，评估靶向翻译（如 mTOR、eIF4F）抑制剂的实时效应。结直肠癌类器官（PDO）中已有标准化 Click Chemistry 蛋白合成检测流程（Morral et al., STAR Protocols 2020），支撑患者来源模型的药效与机制研究。

4、干细胞与发育生物学 在小鼠胚胎植入前发育、生殖细胞发生等过程中，OPP 结合生物素 pull-down 可量化全蛋白质组新生肽段变化（Li et al., Bio-protocol 2022），揭示发育阶段特异性翻译开关；亦用于睾丸生精细胞、胰岛细胞等特定细胞类型的蛋白合成活性鉴定。

5、免疫代谢与感染免疫 免疫细胞（T 细胞、髓系细胞等）的活化伴随翻译速率剧变。OPP 可在体定量不同免疫细胞类型的翻译活性（Hidalgo San Jose & Signer, Nat Protoc 2019），用于解析免疫应答、代谢重编程与感染中的蛋白合成动态。

6、蛋白合成抑制剂药效与药物筛选 OPP 本身即嘌呤霉素类翻译抑制剂，可用于评价候选分子的蛋白合成抑制效力与细胞毒性窗口；同时作为"读出端"标签，在高通量筛选中实时报告药物对新生蛋白合成的调控，是翻译靶向药物发现的关键检测元件。

四、使用方法与注意事项

使用方法

储备液配制：称取适量粉末，以 DMSO 或 DMF 溶解制备高浓度储备液（DMSO 中可达 99 mg/mL / ~200 mM）；亦可用 PBS（pH 调至约 5.0）配制，文献报道可达 50 mM。建议惰性气体吹除氧、分装冻存，避免反复冻融。

体外细胞标记：常用工作浓度 1–25 μM，依细胞类型与标记时长（通常 10–60 min 脉冲）优化；加入 OPP 后细胞继续孵育，使其掺入新生肽链并终止延伸。

点击化学偶联：标记后固定/透化样本，于 Cu(I)（如 CuSO4 + 抗坏血酸钠 + THPTA 配体）体系下与叠氮-荧光团或叠氮-生物素反应，实现成像或亲和富集。

在体动物标记：参考剂量小鼠 50 mg/kg 腹腔注射（i.p.），约 1 小时内即可通过流式或成像实现细胞类型特异性翻译速率定量；依组织与模型调整。

检测读数：荧光/高内涵显微镜观察亚细胞分布；链霉亲和素 pull-down 结合 Western blot 或 LC-MS/MS 做定量分析。

注意要点

本品为科研用活性化合物，严禁用于人体、临床注射、兽药或食品添加。

含炔基的有机分子，DMSO/DMF 储备液建议现配现用、分装冻存；水相溶液不宜长期保存。

CuAAC 反应需控制铜浓度与反应时间，避免铜诱导的蛋白损伤或背景荧光；建议设无叠氮标签或阴性对照排除非特异信号。

OPP 会提前终止翻译并降低整体合成，长时处理可能影响细胞活力，建议以短脉冲标记获取"近期翻译"快照。

水相中溶解度有限，若需水相递送，优先采用 DMSO 储备液稀释并控制有机溶剂终浓度。

操作佩戴手套、护目镜与防尘口罩（N95），避免吸入粉尘或接触皮肤、黏膜；密封、避光、-20℃ 干燥保存。

仅限实验室体外科研与实验动物研究使用。

五、总结与展望

O-Propargyl-Puromycin（OPP）凭借嘌呤霉素式翻译终止、末端炔基生物正交点击、完整培养基兼容、活细胞与在体双标记、成像-组学双轨读出等核心优势，已成为新生蛋白合成检测领域的标杆级 Click Chemistry 工具。它有效解决了传统放射性标记（35S-Met）的安全与定量瓶颈，以及 AHA/HPG 甲硫氨酸类似物须饥饿培养基、干扰生理状态的行业痛点，让研究者能在近生理条件下，干净、动态地解析"谁在合成蛋白、合成多少、在哪里合成"。

当前，基于 OPP 搭建的翻译活性成像、细胞类型特异性定量、类器官药效评价与全蛋白质组新生肽段分析平台，已广泛支撑神经科学、肿瘤生物学、干细胞与发育、免疫代谢及翻译靶向药物研发等核心方向。随着空间蛋白质组、活体动态成像与高通量翻译调控筛选的持续升级，OPP 作为经典的嘌呤霉素炔类似物，将在生命科学、生物医药与创新药物发现中持续发挥关键支撑作用，为全球科研与产业提供靶点清晰、操作便捷、批次可靠的新生蛋白合成检测保障，助力机制解析与科研成果高效转化。