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读懂 cAMP,轻松判断 Gs/Gi 通路激活状态

发布人:上海优宁维生物科技股份有限公司

发布日期:2026/6/8 11:30:40

在细胞信号传导网络中,第二信使承担着传递胞外指令、调控细胞生理活动的核心作用。环磷酸腺苷(cAMP)是被研究最深入、应用最广泛的第二信使之一,尤其在 G 蛋白偶联受体(GPCR)信号通路中扮演着 “信号标尺” 的角色。今天我们先全面科普 cAMP 的基础知识与通路功能,再介绍一款针对 cAMP 定量检测的专业试剂盒。

一、认识 cAMP:细胞内经典的第二信使

1. 基本概念

cAMP 全称环磷酸腺苷,是细胞内重要的小分子信号物质。外界的激素、神经递质、药物等信号分子无法直接进入细胞,它们结合细胞膜受体后,会启动胞内反应,催化三磷酸腺苷(ATP)转化为 cAMP;同时细胞内的磷酸二酯酶会持续分解 cAMP,一合成一降解形成动态平衡,以此精准调控细胞内 cAMP 的浓度。

2. 主要生理功能

cAMP 广泛分布于人体各类组织细胞中,参与调控多项基础生命活动:包括糖脂代谢、心肌收缩、平滑肌舒张、神经信号传递、细胞增殖与分化、免疫调节等。从内分泌调控到神经活动,再到机体代谢运转,几乎都离不开 cAMP 的参与。一旦 cAMP 浓度失衡,往往会引发代谢疾病、心血管疾病、神经系统疾病等多种问题。

二、cAMP 与 Gs/Gi 信号通路:药物研发的核心标尺

cAMP 的浓度变化,是判断Gs、Gi 型 G 蛋白信号通路激活状态最直观的指标,而 GPCR 又是目前全球药物研发的主流靶点,二者关联十分紧密:

1.Gs 信号通路:当 Gs 型 G 蛋白偶联受体被激活时,会促进腺苷酸环化酶发挥作用,细胞内 cAMP 含量显著上升

2.Gi 信号通路:当 Gi 型 G 蛋白偶联受体激活后,会抑制腺苷酸环化酶的活性,导致细胞内 cAMP 含量明显下降

简单来说,检测细胞中 cAMP 的积累量与变化幅度,就能直接判断 Gs/Gi 通路是被激活还是被抑制。在靶向 GPCR 的小分子药物、候选化合物筛选工作中,cAMP 定量检测是必不可少的核心实验。

传统检测方法流程复杂、需要反复洗板、检测速度慢,很难满足大批量化合物同步筛查的高通量需求,因此操作简便、性能稳定的专用检测工具成为科研与药企的刚需。

三、UniOne® TR-FRET Human cAMP Hirange Detection Kit:cAMP 高效检测方案

这款试剂盒依托均相时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET) 技术研发,专门用于精准测定细胞样本中的 cAMP 含量,完美适配 Gs/Gi 信号通路研究与 GPCR 药物高通量筛选。

产品链接:UniOne- TR-FRET Human cAMP Hirange Detection Kit_UA BIOSCIENCE_优宁维(univ)商城

1. 检测原理(竞争法体系)

试剂盒核心包含两种关键反应组分:Eu 标记的抗 cAMP 抗体(TR-FRET 荧光供体)、Ac 标记的 cAMP(TR-FRET 荧光受体),整套反应为均相体系,全程无需洗板

· 当体系中没有游离 cAMP时:Eu 标记抗体与 Ac 标记的 cAMP 发生特异性结合,荧光供体与受体相互靠近。在特定光源激发下,供体发生荧光共振能量转移(FRET),促使受体释放出665 nm的特征荧光,此时检测信号达到最强。

· 当加入细胞样本或标准品后:样本中天然存在的游离 cAMP,会与体系内 Ac 标记的 cAMP 形成竞争关系,抢夺 Eu 标记抗体的结合位点。样本中 cAMP 浓度越高,竞争结合能力就越强,能够形成有效 FRET 复合物的组分就越少,最终 665 nm 荧光信号也会随之降低。

实验中的荧光信号强度,与 Eu 标记抗体、Ac 标记 cAMP 的结合程度成正比。通过梯度标准品绘制标准曲线,即可精准换算出待测细胞样本中 cAMP 的实际浓度。

2. 核心应用场景

· 信号通路研究:实时监测 Gs、Gi 信号通路的激活与抑制状态,助力 GPCR 通路机制探索;

· 高通量药物筛选:大规模筛选靶向 Gs/Gi 通路的候选化合物,快速评价药物对通路的调控效果;

· 常规样本定量:对不同处理条件下的细胞样本进行 cAMP 精确定量,优化实验体系与细胞培养条件。

3. 产品核心优势

基于 TR-FRET 技术本身高特异性、高灵敏度的特点,检测数据稳定、重复性佳;加上均相免洗的设计,极大简化了实验操作、缩短检测耗时,既可以满足实验室常规小样本检测,也能适配自动化设备开展高通量筛选工作。

 

名称
货号
规格
UniOne® TR-FRET Human cAMP Hirange Detection Kit
1000T
UniOne® TR-FRET Human cGMP Detection Kit
100T
UniOne® TR-FRET His Check kit
500T

 


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