一、STAT6 通路失控,诱发全身多类炎症疾病
STAT6 是 IL-4/IL-13 信号下游核心转录蛋白,也是 Th2 型炎症的 “总开关”。当 IL-4、IL-13 刺激免疫细胞后,STAT6 被激活并启动基因转录,促使细胞大量分泌 CCL17(又称 TARC);CCL17 作为关键趋化因子,会募集炎性细胞聚集浸润,诱发各类炎症与自身免疫问题。
受该通路影响的疾病覆盖面极广:
呼吸道病症:哮喘、慢阻肺、慢性鼻窦炎、肺纤维化;
皮肤顽疾:特应性皮炎、银屑病、慢性荨麻疹、斑秃;
自身免疫病:红斑狼疮、类风湿关节炎、克罗恩病;
其他:阿尔茨海默病、糖尿病肾病、实体肿瘤、顽固性皮肤瘙痒。
因此,研发 STAT6 抑制剂,是目前全球炎症新药的热门方向。
二、辉瑞重磅专利落地,BioAuxilium CCL17/TARC Kit成为药效检测标志物
BioAuxilium THUNDER TR-FRET CCL17/TARC 试剂盒在该专利中被用来检测血液样本,具体操作原文阐述如下:
将待测化合物溶于DMSO,配制11个浓度梯度(三倍稀释,复孔),384孔V型聚丙烯板每孔上样80nl。采集健康志愿者外周静脉血,加入肝素抗凝(每50ml血加入714单位肝素)。每孔加入60 μl全血,37°C预孵育2小时。每孔加入20μl含10ng/mL IL-13的HBSS缓冲液(含Ca²⁺/Mg²⁺),模拟Th2型炎症反应。37°C继续培养48小时,促进CCL17分泌。1500rpm离心7分钟,取16 μl上清转移至检测板。使用BioAuxilium CCL17 TR-FRET试剂盒,避光室温孵育16小时。酶标仪检测665nm/615 nm荧光比值(TR-FRET信号)。

三、TR-FRET 均相检测,CCL17 检测优选方案
THUNDER TR-FRET 依托双抗体夹心法原理,两种荧光标记抗体特异性结合 CCL17 后产生特征荧光,信号强弱与 CCL17 浓度成正比。
对比传统 ELISA:全程免洗,1 小时即可完成检测,检测跨度 2.4–30000pg/ml,灵敏度高、线性范围宽,适配 384 孔高通量药物筛选,是人 / 小鼠 CCL17 定量首选工具。
现有人源、小鼠 CCL17/TARC 两款成熟试剂盒,规格可选 100/500/2500/5000/10000points,既能满足实验室基础通路研究,也适配药企大批量化合物筛选。
