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Biotin-西红花苷I,生物素标记西红花苷I,西红花苷I-生物素Biotin-Crocin I

发布人:陕西星贝爱科生物科技有限责任公司

发布日期:2026/11/10 15:09:18

Biotin-西红花苷I(Biotin-Crocin I)是将藏红花中提取的水溶性类胡萝卜素活性分子西红花苷I与生物素通过稳定共价键偶联形成的双功能亲和探针‌,既完整保留西红花苷I的神经保护、抗氧化天然活性,又依托生物素的超高亲和特性实现靶点富集与分子示踪,是天然产物化学生物学研究领域的核心工具试剂。

一、核心结构与理化特性

西红花苷I母核是含4个葡萄糖单元的水溶性类胡萝卜素,是藏红花色素的核心活性成分。

外观为橙红色至深红色固体粉末,常规科研级产品经HPLC纯化后纯度≥95%。

多葡萄糖单元赋予分子优异水溶性,生物素标记后在中性缓冲液、细胞培养液中分散性极佳,不易发生聚集沉淀。

生物素端完整保留脲基环结构,与链霉亲和素的结合常数Kd≈10⁻¹⁵ M,特异性识别不受西红花苷I母核结构干扰。

分子自带特征橙红色,在440 nm左右有强紫外-可见吸收峰,无需额外荧光标记即可直接进行光谱定量分析。

-20℃密封避光干燥条件下可稳定储存12个月,强光直射易破坏共轭多烯骨架导致褪色失活。

二、合成制备方法

位点选择性活化‌:预先保护西红花苷I的非目标葡萄糖羟基,定向选择末端游离羟基作为偶联位点,避免破坏共轭多烯活性骨架。

‌EDC/NHS活性酯偶联工艺‌:在弱碱性低温无水体系中活化生物素羧基,与西红花苷I的羟基发生亲核取代反应,全程避光保护共轭双键不被氧化。

‌产物纯化工艺‌:粗产物经反相C18柱层析(水/甲醇梯度洗脱)分离,最终产物通过高分辨质谱、核磁共振氢谱完成结构验证。

可引入短链PEG柔性连接臂消除空间位阻,进一步提升生物素与链霉亲和素的结合效率。

三、科研应用场景

  1. Pull-down + LC-MS/MS 化学蛋白质组学富集西红花苷 I 特异性结合蛋白,筛选 Nrf2、NF-κB、抗氧化、神经保护、肝肾保护相关靶点;游离西红花苷 I 竞争对照是必设对照组,用来区分特异性结合与非特异吸附。

  2. 小分子 - 蛋白互作验证:SPR、ITC、蛋白芯片,定量验证 Crocin I 与靶蛋白的结合亲和力、评估结合特异性。

  3. 细胞 / 组织荧光示踪:搭配 SA-Cy3 / SA-Cy5 荧光标记链霉亲和素,追踪探针在神经元、肾小管上皮细胞、肝细胞中的分布、亚细胞定位。

  4. 类胡萝卜素构效研究:对比西红花苷元、西红花苷 II/III 探针富集差异,解析糖基化对靶点识别、抗氧化活性的影响。


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