凋亡阳性对照不稳？Staurosporine 1μM诱导90%凋亡，可复现

1. Staurosporine 为什么是凋亡阳性对照标配？

货号 abs810006 的 Staurosporine（星形孢菌素，AM-2282、STS）是微生物来源的广谱激酶抑制剂，CAS 62996-74-1，分子式 C28H26N4O3，分子量 466.54，纯度＞98%，白色至淡黄色固体。它最出名的角色是凋亡阳性对照：1 µM 处理 PC12 细胞诱导超过 90% 凋亡，这条线几乎是凋亡检测体系的标配质控。酶活上它是强效 PKC 抑制剂，PKCα、PKCγ、PKCη 的 IC50 分别为 2、5、4 nM。

2. 纳摩尔抑制谱怎么读、怎么防归因翻车？

选择性数据要记牢，不然实验解释容易出偏差：对 PKCδ（20 nM）与 PKCε（73 nM）作用较弱，PKCζ 几乎不敏感（1086 nM）；PKA、PKG、磷酸化酶激酶、S6K、MLCK、CaMKII、cdc2、v-Src、Lyn、c-Fgr、Syk 也有纳摩尔级抑制。大鼠脑 PKC 的 IC50 为 2.7 nM，HeLa S3 细胞增殖抑制 IC50 4 nM。把它当 PKC 特异工具药用在别的体系里，读数归因要格外小心。

3. 凋亡机制读数有哪些、体内怎么用？

凋亡机制层面它给的读数很全：1 µM 处理引起胞内游离钙快速持续升高、线粒体 ROS 积累与线粒体功能障碍；MCF7 的凋亡可经 caspase-8 激活与 Bid 切断被功能性 caspase-3 增强；AG-1518 成纤维细胞的凋亡依赖溶酶体组织蛋白酶 D 介导的细胞色素 c 释放；它还能触发一条不依赖 Apaf-1 的 caspase-9 活化通路。体内参考值来自沙鼠与大鼠脑缺血模型，缺血前 0.1-10 ng 预处理剂量依赖地减轻神经元损伤。

4. DMSO 8.57 mM 的母液怎么配、怎么存？

溶解走 DMSO：4 mg/mL，折合 8.57 mM，是同批工具药里溶解度偏低的一个，配 10 mM 母液不现实，建议按 4 mg/mL 上限储备再逐级稀释。储存分三档：粉末 -20℃ 三年，2-4℃ 两周，溶解后 -20℃ 六个月，运输走蓝冰。母液分装避反复冻融，工作液现用现稀；规格 1、5、25 mg，阳性对照用量省，1 mg 通常够用很久。

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