抗体亲和力和抗体亲合力：究竟有什么区别？

发布人：安迪赛斯（武汉）科技有限公司

发布日期:2026/10/21 16:33:03

抗体结合行为 · 基础概念

区分单个位点结合强度与多价结合的整体效果

在抗体研究中，亲和力（Affinity）和亲合力（Avidity）都描述抗体与抗原的结合行为，但关注的层面不同。

为什么 ELISA 信号更强，不一定意味着抗体亲和力更高？关键在于区分单个位点的结合强度与多个结合相互作用形成的整体结合效果。

一、什么是抗体亲和力（Affinity）？

亲和力描述抗体单个抗原结合位点与相应表位之间的结合强度，受氢键、静电相互作用、范德华力和疏水相互作用等影响。

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KD = koff / kon

kon 为结合速率常数，koff 为解离速率常数

亲和力通常通过平衡解离常数 KD 表征。在适当的测量模型下，KD 越低，通常表示亲和力越高。因此，亲和力不能只看结合速度，还需考虑解离行为。

什么时候需要关注亲和力？

比较抗体单个结合位点的结合能力，或评估抗体改造是否改善结合性能时，亲和力尤其重要。例如，在可比条件下，两种抗体的 KD 分别为 1 nM 和 10 nM，前者通常具有更高的亲和力。

SPR（表面等离子体共振）和 BLI（生物层干涉）可用于分析结合动力学并估算 KD。但多价结合和再结合可能影响测量结果，使其反映表观结合行为，而非单个位点的内在亲和力。

亲合力描述多个结合相互作用共同产生的整体结合强度与稳定性。

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典型 IgG 有两个抗原结合位点。当抗原具有合适的重复表位及空间排列时，两个位点可能同时结合。即使一个位点解离，另一个仍可能保持结合；已解离的位点也可能重新结合，使整个抗体更难脱离抗原。

为什么 IgM 的亲合力可能很高？

分泌型五聚体 IgM 通常具有十个潜在抗原结合位点。当抗原结构适合多点结合时，这些相互作用可能提高整体结合稳定性。

但这不意味着 IgM 的单个位点亲和力一定很高。亲和力关注单个位点，亲合力关注多个相互作用形成的整体效果。实际亲合力还取决于表位间距、抗原结构和结合位点可及性，不能仅凭位点数量判断。

亲合力不是多个亲和力数值的简单相加，还受到多价结合和再结合等因素影响。

若要评估单个位点的内在亲和力，应通过适当设计减少多价结合和再结合干扰，必要时考虑使用单价 Fab。若研究完整抗体与多价抗原的整体结合，则需考虑亲合力效应。结果应结合分子形式、固定方式、实验条件和拟合模型解读。

不一定。ELISA 信号还受抗体浓度、抗原包被量、抗原呈递方式和检测体系影响。信号更强不能直接证明单个位点亲和力更高。比较内在亲和力时，不应只依赖 ELISA 吸光度。

关键提示：如果目的是比较内在亲和力，不能只看 ELISA 吸光度，还需要选择能够回答这一问题的测量方法。

日常检测通常不必先测亲和力或亲合力，应优先考虑抗体特异性、应用验证和实验条件。

即使抗体具有较高亲和力，若样本处理改变了目标表位，或流式实验中的表位不易接近，也可能无法获得理想结果。

不一定。高亲和力不等于高特异性，也不代表抗体适用于所有实验。抗原构象、表位可及性、样本处理和检测体系都会影响实际表现。选择抗体时，应结合实验目的、特异性和应用验证数据综合判断。

重要结论：亲和力和亲合力有助于理解抗体的结合行为，但不能单独决定抗体在某种实验中的表现。这些还需要结合实验目的、抗体特性和具体条件来综合判断。

亲和力

单个位点与抗原表位结合得有多紧？

亲合力

多个结合相互作用共同参与时，整体结合有多稳定？

比较单个位点的结合能力，应关注亲和力及动力学参数；研究多价结合时，则需考虑亲合力。实际选择抗体还应结合实验目的、特异性和应用验证数据。

Immunobiology: The Immune System in Health and Disease. 5th edition.
Affinity Enhancement of Antibodies: How Low-Affinity Antibodies Produced Early in Immune Responses Are Followed by High-Affinity Antibodies Later and in Memory B-Cell Responses.
Understanding Antibody-Target Antigen Interactions and the Avidity Effect Using Mathematical Modelling.