Cat IL-8 ELISA Kit一步法好做吗？

1. 猫IL-8（CXCL8）在炎症研究中测什么？

白细胞介素8又称CXCL8，是典型趋化性细胞因子，由单核巨噬细胞、内皮细胞与上皮细胞在炎症刺激下分泌，负责招募并活化中性粒细胞。在猫呼吸道疾病、肠道炎症与术后感染监测中，IL-8常作为中性粒细胞募集强度的直接读数。货号abs554748的Cat IL-8 ELISA Kit反应种属为Cat，用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中猫IL-8（CXCL8）含量，2-8℃保存、有效期6个月。

2. 双抗体一步夹心法与两步法有何不同？

该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验。往预先包被猫IL-8捕获抗体的包被微孔中依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经温育并彻底洗涤后用TMB显色。TMB在过氧化物酶催化下转蓝、加酸后转黄，颜色深浅与样品中猫IL-8呈正相关，450nm测吸光度计算浓度。一步法将样本与HRP标记检测抗体同时加入，省去两步法中间的洗涤环节。96T配置含微孔酶标板12孔×8条、标准品0.3mL×6管、检测抗体-HRP 10mL。

3. 一步法ELISA的操作步骤怎么走？

从室温平衡20分钟后的铝箔袋中取出板条，余板密封放回4℃。标准品孔各加标准品50uL，样本孔加待测样本50uL，空白孔不加；除空白孔外每孔加入HRP标记检测抗体100uL，封板膜封孔后37℃温育60分钟。弃液拍干，每孔加满洗涤液350uL静置1分钟，重复洗板5次。每孔加底物A、B各50uL，37℃避光孵育15分钟；加终止液50uL，15分钟内在450nm测定各孔OD值。20×洗涤缓冲液需按1:20稀释使用。

4. 检测范围5-160pg/ml与上样量如何把控？

该试剂盒检测范围5-160pg/ml，最低检测浓度小于1.0pg/ml，标准品浓度依次为160、80、40、20、10、5pg/ml。正常标本浓度值多在检测范围内，直接取50uL上样即可；样本值超过最大标准品浓度时可用样本稀释液适当稀释后重测，计算时乘以稀释倍数。计算以标准品OD值为横坐标、浓度值为纵坐标绘制标准曲线，得直线回归方程后代入样品OD值。特异性不与其它可溶性结构类似物交叉反应，板内变异系数小于10%、板间小于15%。

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