Recombinant Human TRIM64B蛋白怎么用

1. Human TRIM64B是什么？结构域怎么排？

TRIM64B 全称 Tripartite motif containing 64B，属 TRIM（RBCC）家族。这类蛋白通常带 RING 指、B-box 与 coiled-coil 三段结构，RING 结构域多与泛素连接酶活性挂钩，coiled-coil 负责寡聚。货号 abs0712604 的 Recombinant Human TRIM64B 蛋白对应 UniProt A6NI03，给出 100 个氨基酸区段，理论分子量 55 kDa，种属 Human。拿到片段先与全长比对，确认是否覆盖 RING 或 B-box，这一步直接决定后面能不能做酶活。

2. Recombinant Human TRIM64B蛋白怎么表达纯化？

货号 abs0712604 的 Recombinant Human TRIM64B 蛋白由 HEK293 表达。真核表达系统能提供更完整的折叠环境，TRIM 家族常见的寡聚倾向也有更高概率被正确处理。产物带 N-MBP&C-His 双标签：N 端 MBP 提高可溶性，C 端 His 供镍柱亲和纯化。洗脱后按峰收集，SDS-PAGE 确认 55 kDa 附近单一条带，OD280 定量后分装。

3. TRIM64B重组蛋白能做哪些实验？

TRIM64B 重组蛋白常接这几类实验：体外泛素化反应里作 E3 候选，与 E1、E2、泛素共孵育后看底物是否出现高分子量条带；Pull-down 用 His 标签钓候选底物；Western blot 验证抗体特异性；ELISA 包被筛血清；SPR/BLI 测互作亲和力；质谱鉴定泛素化位点。做酶活相关实验时，MBP 标签的空间位阻不能忽略，需要时先酶切去除再上机。

4. TRIM64B蛋白怎么用PBS复溶与冻存？

复溶介质按产品页写的是 Phosphate buffered saline。开盖前离心把粉末集中到管底，加入 PBS 至所需浓度，室温放置几分钟让其充分溶解，轻吹助溶，不要用涡旋振荡器。溶解后分装成单次用量，-20℃ 冻存，产品页标注效期 12 months，同时提示避免反复冻融。频繁冻融的样品到第 2、3 次使用时常出现聚集，定量实验前建议先离心取上清。

爱必信产品推荐