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生物素-牛血红蛋白Biotin-Bovine Hb血红素蛋白亲和钓靶探针

发布人:陕西星贝爱科生物科技有限责任公司

发布日期:2026/7/29 17:43:39

生物素-牛血红蛋白(Biotin-Bovine Hemoglobin) 通过酰胺键 / LC 柔性连接臂修饰四聚体表面远端氨基,最大限度保留天然四级结构、血红素辅基、氧气可逆结合能力;融合携氧血红素蛋白特性与生物素 - 链霉亲和素超高富集系统,用于亲和垂钓血红蛋白、血红素互作蛋白;搭配荧光链霉亲和素实现细胞荧光示踪,是解析血红素铁代谢、氧化应激、病原铁摄取机制的核心血红素蛋白探针。

一、分子结构特征

模块化双功能结构,支持短连接臂 / LC 长柔性连接臂两种构型,缓解空间位阻

功能识别端:牛血红蛋白 Bovine Hemoglobin

维持 α₂β₂四聚体结构与亚铁血红素配位环境;核心生物学特征:

①亚基血红素位点可逆结合 O₂、CO,具备协同氧结合效应;

②游离血红蛋白释放血红素,参与机体血红素铁转运与吸收;

③亚铁血红素易自氧化生成高铁血红蛋白,释放 ROS 诱发氧化应激、脂质过氧化;

④致病菌表面受体特异性识别血红蛋白,掠夺血红素作为必需铁源;

⑤肠道上皮介导血红蛋白内吞,是血红素铁吸收的重要途径。

亲和捕获端:生物素(Biotin)

依托经典生物素 - 链霉亲和素系统(Kd≈10⁻¹⁵ M)。探针与肠上皮细胞、免疫细胞、致病菌裂解样本孵育结合后,链霉亲和素磁珠富集蛋白复合物,结合 LC-MS 质谱鉴定未知互作靶点;搭配荧光标记链霉亲和素实现共聚焦成像,可视化细胞表面血红蛋白结合位点分布。

二、理化参数

中文名称:生物素 - 牛血红蛋白

英文名称:Biotin-Bovine Hemoglobin

母体来源:牛红细胞(CAS:9008-02-0)

分子量:天然四聚体~64.5 kDa

物质组成:该复合物由生物素(Biotin)与牛血红蛋白(Bovine Hemoglobin)通过化学方法连接而成。牛血红蛋白是牛红细胞中负责运输氧气和二氧化碳的含铁复合变构蛋白,其分子量约为 64,500 Da。

三、生物素-牛血红蛋白的优势与局限性

优势

生物素修饰选取四聚体外侧氨基,远离血红素口袋,最大程度保留氧结合、血红素互作活性;

LC 长柔性连接臂可选,降低空间位阻,提升膜受体、微生物蛋白富集效率;

完整保留天然四聚体协同效应,高度模拟体内游离血红蛋白生理状态;

红棕色自带特征紫外吸收,便于光谱法同步监测蛋白稳定性。

局限性

球状蛋白易发生非特异性疏水吸附,必须设置游离牛血红蛋白竞争对照组

体系接触空气易发生血红素氧化,Pull-down 实验尽量减少敞口操作;

强氧化剂、高浓度还原剂会破坏血红素配位键,造成辅基脱落;

长时间孵育会发生蛋白解离,四聚体拆分为游离 α/β 单体,改变结合特性。




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