NTA磁珠，瑞禧试剂，以磁性聚合物或琼脂糖为基质

中文名称：NTA磁珠，次氮基三乙酸（NTA）磁珠

英文名称：Nitrilotriacetic Acid (NTA) Magnetic Beads

核心参数：

1. 粒径范围：400 nm至50 μm（不同产品存在差异）

2. 磁性强度：60 emu/g（超顺磁性）

3. 结合容量：10–60 mg His标签蛋白/mL磁珠（具体数值因蛋白特性及产品型号而异）

4. 化学稳定性：兼容8 M尿素、5% Triton X-100、1 M NaCl等变性剂及去污剂

技术原理与功能特点

NTA磁珠以磁性聚合物或琼脂糖为基质，表面通过共价键修饰NTA螯合基团，可高效螯合二价镍离子（Ni²⁺）。其核心功能是通过金属螯合亲和作用（IMAC）特异性捕获带有6×His标签的重组蛋白。

1. 高密度结合位点：NTA分子含四个金属结合位点，形成稳定八面体结构，可牢固固定Ni²⁺，减少金属离子浸出，提升结合稳定性。

2. 多点亲和捕获：磁珠内部渗透性设计允许蛋白分子与NTA-Ni²⁺位点多点结合，增强靶蛋白捕获效率，同时耐受高浓度咪唑（如80 mM），降低非特异性吸附。

3. 快速磁分离：超顺磁性颗粒可在10秒内完成磁分离，避免传统离心或过滤步骤的样品损失，提升回收率。

产地：西安瑞禧生物

包装形式：棕色玻璃瓶

保存条件：4–8℃（避免冷冻或干燥）

用途：科研专用

应用场景与操作流程

NTA磁珠适用于从复杂生物样本（如细胞裂解液、培养上清液）中纯化His标签蛋白，支持天然及变性条件下的操作：

1、样品准备：

原核/真核细胞裂解液需经超声破碎或酶解处理，并通过离心或过滤去除细胞碎片。

包涵体蛋白需在8 M尿素变性条件下溶解后纯化。

2、结合与洗涤：

使用含10–20 mM咪唑的缓冲液平衡磁珠，加入样品后室温孵育5–30分钟。

通过20–50 mM咪唑缓冲液洗涤3次，去除杂蛋白。

3、洗脱与回收：

采用250–500 mM咪唑缓冲液洗脱靶蛋白，分步收集洗脱液以提高回收率。

洗脱后蛋白可直接用于SDS-PAGE、Western blot或质谱分析。

兼容性与扩展功能

NTA磁珠兼容多种缓冲体系及添加剂：

1. 盐浓度：支持0–2 M NaCl，抑制非特异性离子相互作用。

2. 变性剂：耐受8 M尿素或6 M盐酸胍，适用于包涵体蛋白纯化。

3. 去污剂：兼容1% Triton X-100或Tween 20，维持膜蛋白稳定性。

此外，部分产品（如MSP-NTA）支持螯合钴（Co²⁺）或铜（Cu²⁺），拓展了金属离子选择范围，适用于低丰度蛋白或特殊相互作用研究。

注意事项与维护

1. 储存条件：磁珠需悬浮于20%乙醇中，4℃避光保存，避免干燥或离心导致性能下降。

2. 再生处理：连续使用8–10次后，需通过EDTA剥离金属离子、NaOH清洗及NiSO₄重新螯合恢复结合容量。

3. 操作优化：咪唑浓度、pH值及离子强度需根据靶蛋白特性调整，例如提高洗涤缓冲液咪唑浓度（至100 mM）可进一步提升纯度。

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