Navinci Naveni™ PLA：原位可视化蛋白互作的前沿技术

一、Navinci：邻近连接技术的引领者

Navinci 是一家专注于蛋白质相互作用研究的瑞典生物技术公司。2020 年，公司对其核心的邻近连接技术进行了重大升级，推出了Naveni™ Proximity Ligation Technology。该技术基于全新的 UnFold 专有平台，相比传统 PLA，在特异性、灵敏度和抗体选择灵活性上实现了质的飞跃，致力于解决蛋白质研究中的核心挑战。

二、Naveni™ PLA：精准原位检测蛋白互作

Naveni™原位邻近连接技术突破了传统荧光方法的局限，使研究人员能够在分子水平上原位可视化和量化蛋白质、它们的相互作用和修饰。其核心优势在于，能够检测低丰度蛋白质，确保可以研究蛋白质的天然状态，而无需过度表达或改变细胞的自然环境。

技术工作原理

Naveni™ PLA 的工作流程分为五个关键步骤，通过邻近依赖的信号放大，实现对目标蛋白互作的精准检测：

1,封闭样本（Blocking）：首先对样本进行封闭处理，以阻断非特异性结合位点，为后续反应提供干净的背景。

2,一抗孵育（Primary antibodies）：使用两种针对不同表位的一抗，分别结合到目标蛋白（或邻近的两种蛋白）上。

3,Navenibody 孵育（Navenibodies）：Navenibodies 是与专有寡核苷酸臂结合的精选抗体，它们会特异性地识别并结合到之前的一抗上。

4,DNA 环形成（Circle formation）：当两个 Navenibodies 因目标蛋白互作而足够邻近时，其携带的寡核苷酸臂会相互作用，形成一个闭合的 DNA 环。这一步是保证高特异性的核心，只有真正的邻近事件才能触发环化，从而减少非特异性背景染色。

5,扩增和检测（Amplification and detection）：加入聚合酶后，滚环扩增（RCA）过程被启动，产生大量重复的 DNA 序列。标记的检测探针与这些扩增产物结合，最终形成可被显微镜观察到的明亮、离散的荧光亮点。

三、Naveni™ PLA 的核心技术优势

相比传统的蛋白质研究方法，Naveni™ PLA 具有无可比拟的优势：

可视化与量化：提供干净、高分辨率的图像，每个亮点代表一个真实的蛋白质互作事件，可直接进行量化分析。

信号放大：通过滚环扩增，将单个分子事件的信号放大数百万倍，极大增强了检测强度。

超高灵敏度：能够检测到含量极低的蛋白质互作，甚至是微弱的瞬时相互作用。

卓越特异性：DNA 环的形成严格依赖于邻近事件，有效排除了非特异性背景干扰。

原位定位：在完整的细胞和组织结构中，精确定位蛋白质及其互作的位置。

四、常见问题（FAQ）

Q1: Naveni™ PLA 技术与传统的免疫荧光（IF）或免疫组化（IHC）有什么区别？

A: 传统 IF/IHC 主要检测目标蛋白的存在和位置，而 Naveni™ PLA 的核心优势在于检测蛋白质之间的相互作用。它通过邻近依赖的信号放大，能在原位可视化和量化这些互作，这是传统方法难以实现的。

Q2: 该技术对样本类型有什么要求？

A: Naveni™ PLA 具有广泛的适用性，可用于多种样本，包括贴壁细胞、细胞涂片、细胞沉淀、冷冻或石蜡包埋的组织切片，以及组织微阵列（TMA）等。

Q3: 我可以同时检测多个蛋白质互作吗？

A: 是的。通过使用不同颜色的荧光标记探针，Naveni™ PLA 技术支持多重检测，可在同一样本中同时观察和定量多个不同的蛋白质相互作用事件。

Q4: 该技术的灵敏度如何？

A: 由于采用了滚环扩增技术，Naveni™ PLA 的灵敏度极高，能够检测到传统方法无法发现的、极低丰度的蛋白质互作或翻译后修饰。

Q5: 如何选择合适的一抗？

A: Naveni™ PLA 对一抗的兼容性很好，关键在于选择两种能识别目标蛋白（或邻近蛋白）上不同表位的一抗。Navinci 提供了丰富的 Navenibody 产品和技术支持，以帮助客户优化实验方案。