酸化S9的应用（下）：ADC类和小核酸类药物研发

引言

在上篇中，我们揭示了#酸化S9#如何作为传统小分子药物的“代谢守门人”。然而，随着抗体偶联药物（ADC）、小核酸药物等前沿疗法的崛起，药物研发的代谢挑战已发生了范式转移。酸化S9这一经典工具并未过时，而是通过 “精准应用”，在新舞台上继续扮演着关键角色。

一、酸化S9

酸化S9在靶向药物，特别是ADC（抗体偶联药物）和小核酸药物（如ASO、siRNA）的研发中，其应用逻辑与传统小分子药物既有延续性，又有显著区别。

其核心价值在于，提供更贴近肝脏生理环境的复杂酶系统，用于评估这些新型药物或其关键组分（如毒素、连接子、寡核苷酸）的代谢稳定性、活化/失活途径以及潜在的肝毒性风险。

二、在ADC药物研发中的应用

ADC药物由抗体、连接子和细胞毒素（小分子）三部分构成。系统给药后，毒素的肝脏代谢成为影响其疗效与安全性的核心变量。

核心挑战：

游离的毒素（Payload）分子量通常在1000Da以下，本质上仍是一个小分子化学实体。肝脏仍是其主要的代谢和清除器官。

酸化S9的精准切入：

此时，酸化S9的应用对象并非ADC整体，而是其小分子毒素组分。它专门用于解答一个关键问题：毒素在肝脏中会如何被代谢与清除？

1. 评估关键解毒路径

许多毒素（例如喜树碱类衍生物SN-38）的毒性与活性高度依赖于UGT酶介导的葡萄糖醛酸化，这是人体最主要的解毒途径之一。使用酸化S9能稳定UGT活性，从而准确预测毒素在人体内的清除速率和个体代谢差异风险，为临床剂量设计提供关键依据。

2. 预测代谢介导的毒性

某些毒素可能被代谢活化，产生肝毒性产物。酸化S9提供的完整I/II相代谢谱，有助于提前识别这类风险，优化毒素或连接子结构，避免临床中出现不可预见的肝损伤。

3. 支持DMPK策略

毒素的体外代谢数据是构建ADC药物生理药代动力学（PBPK）模型重要的输入参数，使临床药代行为的预测更为精准。

结论：在ADC研发中，酸化S9是专门针对其 “小分子战斗部” 进行肝脏代谢行为研究的 “特化工具”，确保了在释放后能被机体安全处理。

三、小核酸药物研发中的应用

小核酸药物（如ASO、siRNA）的代谢机制与传统药物截然不同，它们主要被核酸酶降解，而非CYP450代谢。这导致了对体外评估工具的截然不同的需求。

核心应用：使用标准（非酸化）肝S9作为“金标准”测试系统

值得注意的是，在这一领域，行业标准实践使用的是标准pH（7.4）的肝S9，而非酸化S9。

具体分析如下：

1. 模拟真实的降解环境

肝S9包含了肝细胞胞浆中丰富的内切酶和外切酶，是模拟寡核苷酸在肝脏实质细胞中代谢稳定性相关、可靠的体外系统。

2. 酸化为何不适用？

大多数核酸酶的最近pH在中性范围。酸化环境（pH 6.5）反而可能抑制关键核酸酶的活性，导致高估药物的稳定性，产生误导性的乐观数据。因此，标准S9的中性环境才是正确的选择

3. 核心价值

通过将候选寡核苷酸与肝S9共孵育，研究人员可以定量测定降解半衰期，筛选出抗酶解能力更强的化学修饰策略。 鉴定主要的降解片段，了解其代谢途径，反向指导分子设计。

结论：对于小核酸药物，肝S9是其代谢研究的“基准参照系”，而明确 “不使用酸化S9”，正是基于深刻理解其作用机制后做出的精准科学决策，这本身即是工具价值的体现。

四、酸化S9与不同类型药物研代谢的关系

核心优势：酸化S9提供了一个成本低廉、通量高、且高度模拟肝脏生化环境的初筛平台。它允许研究者在进入更复杂、更昂贵的体内实验或原代肝细胞实验之前，对候选药物的代谢特性进行快速、系统的评估。

局限性：它终究是一个亚细胞水平的静态系统，缺乏完整的细胞结构、跨膜转运过程和生理反馈调节。因此，酸化S9的数据必须与原代肝细胞、肝切片模型以及最终的体内药代/毒理实验结果相互印证，才能做出可靠的决策。

总结

在创新药物的时代，酸化S9已从主要服务于小分子代谢的工具，演进为评估复杂药物中“小分子组分”或“核酸组分”肝脏代谢行为的平台，持续在降低研发后期风险方面发挥关键作用。无论是为ADC毒素提供“专项体检”，还是在小核酸药物研究中充当明确界定的“对照基线”，这种从“通用守门人”到“精准导航仪”的角色转变，正是成熟研发工具科学价值历久弥新的佐证。