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ELISA加样器操作规范性讲述

发布人:上海博湖生物科技有限公司

发布日期:2025/12/1 14:47:36

ELISA加样器操作需严格控制角度、速度和污染风险,核心规范包括45度角加样、避免气泡与孔壁残留、更换吸头及定期校准。

操作核心原则

角度控制:加样枪吸头与板条呈45度角,贴孔壁加样,避免90度垂直滴加导致液体残留。

速度与力度:加样不可过快,防止液体溅出或产生气泡;吸头勿伸入孔内接触孔底,以免污染或压弯吸头。

污染防控:每次加样更换吸头,稀释样本时在微型振荡器上混匀1分钟,避免交叉污染。

加样前准备:

确保微量加样器已校正,以保证加样量的准确性。

加样器应垂直加入标本或试剂,避免刮擦包被板底部。

每次加样前,确保加样器吸头干净,避免污染。

校准与预洗

使用前需校准加样器,确保量程准确。

新吸头需预洗(吸入并排回液体),消除内壁液膜误差。

加样技巧:

加样过程中,滴瓶加液不如加样器好,滴瓶不易控制加液量不准,造成显色不统一。

加样时垂直悬空加入液体,避免加在孔壁上,不可产生气泡。

避免加样枪漏气,加样的量不够,不能用枪吸出再加,需做相应记录。

加样后处理:

加完显色液后,放入一个可推拉的抽屉内,避光振荡。

每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟。

终止时,每孔加终止液50μl,终止反应,15分钟内读取OD值。

‌注意事项

漏气时不可补加,需记录并更换设备。

加样顺序一致,尤其底物和终止液需同步操作。

避免吸头接触孔壁,防止交叉污染。

遵循这些规范,可以确保ELISA实验的准确性和重复性。 

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