ELISA质控品有哪些常见问题？

ELISA质控品使用中的常见问题主要集中在均匀性、稳定性、操作规范及结果解读等方面。以下是具体问题及解决方案：

一、均匀性与稳定性问题

1、‌瓶间差异大‌

‌问题‌：质控品不同瓶间检测值差异显著，影响实验重复性。

‌解决‌：选择均匀性良好的质控品，使用前充分混匀，并参考厂家提供的均匀性数据（如CV%<5%）。

2、‌复溶后稳定性不足‌

‌问题‌：复溶后质控品在7天内检测值与新复溶品差异显著。

‌解决‌：分装保存，避免反复冻融；复溶后尽快使用，或选择稳定性更优的质控品（如37℃热稳定性14天偏差<±15%）。

二、操作规范问题

1、‌加样误差‌

‌问题‌：移液不准导致质控值波动，影响标准曲线准确性。

‌解决‌：校准移液器，使用排枪或自动加样器，避免气泡和交叉污染。

2、‌孵育条件不当‌

‌问题‌：温度或时间偏差导致非特异性结合。

‌解决‌：严格按说明书控制孵育条件（如37℃±0.5℃），使用封板膜防止蒸发。

三、结果解读问题

1、‌回收率异常‌

‌问题‌：质控品回收率超出80%-120%范围，提示样本基质干扰或试剂问题。

‌解决‌：检查样本处理（如避免溶血），或更换更匹配的质控品。

2、‌稀释线性不佳‌

‌问题‌：质控品稀释后检测值与理论值偏差>20%，影响定量准确性。

‌解决‌：验证稀释操作，确保标准品完全溶解，或更换线性范围更宽的试剂盒。

四、质控品选择与保存

‌选择建议‌：优先选择批间差小、稳定性好的质控品，并确保与待测样本基质匹配（如血清/血浆）。

‌保存要求‌：-20℃分装保存，避免反复冻融；复溶后4℃短期保存需验证稳定性。

通过规范操作、严格质控及合理选择质控品，可显著提升ELISA实验的可靠性。