上海优宁维生物科技股份有限公司

THP-1细胞系源自急性单核细胞白血病，具备多向分化潜能，是研究免疫与炎症的优选工具。其培养需维持酸性环境，推荐传代比例适中，培养条件严格。复苏、传代、冻存操作细致，注意避免细胞聚团与贴壁问题。

 

THP-1细胞培养指南

 

 

复苏步骤

 

准备工作：确保所需物品如离心管、培养瓶/皿、RPMI 1640培养基、FBS、双抗等齐全，并经过紫外消毒及水浴锅预热至适宜温度。

 

操作流程：

 

1、从超低温存储中快速取出细胞，立即置于预热的水浴中融化。

 

2、转移至细胞操作台，配置含10% FBS和1%双抗的RPMI 1640培养基。

 

3、离心去除冻存液，用新鲜培养基重悬细胞后，接种至预先标记的培养容器中。

 

4、置于标准培养箱中，静待细胞恢复与增殖。

 

注意：维持培养基的微酸性有助于细胞生长，适时观察并调整。

 

 

传代方法

 

鉴于THP-1的低密度依赖性及悬浮特性，推荐以下两种传代方式：

 

半换液法：直接转移部分细胞至新容器中，补充培养基。

 

离心法：离心收集细胞，重悬后分至新容器，并补足培养基。

 

细胞冻存

 

采用DMSO或专用无血清冻存液，收集健康细胞，离心去除上清，加入冻存液后，按梯度降温程序存储于液氮中。

 

 

二、培养心得与注意事项

 

复苏挑战：确保足够数量的细胞进行冻存与复苏，以提高成功率。

 

处理碎片：细胞碎片可通过低密度培养与低速离心自然消除。

 

聚团管理：少量聚团属正常，严重聚团时考虑提高血清浓度或优化培养条件。

 

 

贴壁应对：轻微贴壁可轻吹收集，严重贴壁需检查并调整培养环境。

 

三、问题解析：复苏困难与聚团现象

 

复苏困难：细胞密度是关键，保持适宜的冻存与复苏密度，优化传代管理。

 

聚团严重：聚团可能由营养不足或损伤引起，调整血清用量，避免过高离心速度，并在高密度时自然分散细胞。识别并处理异常聚团，确保细胞健康生长。

 

 

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