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MDA检测重复性差?|丙二醛(MDA)检测试剂盒精准定量脂质氧化水平

发布人:伊势久(江苏连云港)生物科技有限责任公司

发布日期:2026/7/20 16:14:59

在氧化应激机制、疾病病理、植物抗逆、毒理评价、食品品质等研究领域,脂质过氧化程度是反映生物体系氧化损伤水平的核心指标。其中丙二醛(Malondialdehyde, MDA)作为脂质过氧化具代表性的终产物,其含量检测已成为氧化损伤评估的关键实验。

今天为大家详细介绍这款丙二醛(MDA)检测试剂盒,基于经典硫代巴比妥酸显色原理,搭配双波长背景校正技术,可稳定、准确地完成各类样本中的MDA定量,广泛适配多领域的氧化损伤研究需求。

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一、为什么要检测MDA?应用场景全覆盖

氧自由基攻击脂质中的不饱和脂肪酸,会生成过氧化脂质;而过氧化脂质会逐步分解为一系列复杂产物,MDA便是其中最核心的标志物。通过检测MDA的含量,可直接反映体系中脂质氧化的水平,间接评估氧化应激的严重程度。

本试剂盒可广泛应用于多个研究方向:

1.医药与毒理研究:疾病氧化损伤机制探究、抗氧化药物药效评价、化合物毒理安全性检测。

2.植物生理研究:干旱、高温、病害、盐碱等逆境胁迫下的植物氧化损伤评估等。

3.食品科学领域:油脂及含油食品的氧化变质程度检测、保鲜工艺与抗氧化添加剂效果评价。

4.微生物与细胞研究:细菌、培养细胞的氧化应激响应机制研究、细胞损伤程度评价。

二、检测原理:经典方法优化,双波长校正更精准

本试剂盒基于经典的硫代巴比妥酸(TBA)显色法,并通过双波长设计有效降低背景干扰:

1.显色反应:MDA与硫代巴比妥酸(TBA)在酸性高温条件下发生缩合反应,生成稳定的红色产物,该产物在532nm波长处有特征最大吸收峰,通过比色即可定量过氧化脂质含量。

2.双波长校正:同步检测600nm处的非特异性吸光度,通过ΔA = A532 - A600的差值计算MDA含量,有效消除样本中可溶性糖、蛋白、色素等杂质带来的背景干扰,大幅提升检测准确度。

三、四大核心优势,打造稳定高效的检测体验

1. 样本适配广泛,处理方案成熟

针对血清/血浆、动植物组织、培养细胞、细菌等不同样本,均配套了标准化的样本提取与处理流程,可直接参照执行,无需额外摸索实验条件。

2. 体系稳定可靠,结果重复性好

优化的试剂配方与反应条件,有效降低非特异性显色反应;配合标准化操作流程,检测差异小,数据稳定性与重复性有保障。

3.线性范围宽泛,适配性强

有效检测ΔA范围为0.005~1.5,可覆盖低至高浓度的MDA样本;对于超出范围的样本,可通过调整样本用量、稀释样本实现准确定量,适配不同浓度水平的各类样本。

4. 操作简便快捷,常规设备即可完成

试剂配制流程简单,工作液单瓶复溶即可使

四、标准操作流程,分步执行零障碍

第一步:试剂配制

临用前配制工作液:取1瓶试剂二粉剂,全部加入对应体积的试剂一中,充分溶解混匀。若溶解困难,可通过70℃~90℃水浴加热、剧烈振荡或超声处理助溶;待工作液完全溶解并冷却至室温后再使用,4℃避光保存可稳定一周。

第二步:样本制备

根据样本类型选择对应提取方案,全程冰上操作:

细菌/培养细胞:收集细胞或细菌离心弃上清,按500万细胞/细菌:1mL提取液的比例加入提取液,冰浴超声破碎(功率20%,超声3s、间隔10s,重复30次);8000g4℃离心10min,取上清待测。

组织样本:按组织质量(g):提取液体积(mL) = 15~10的比例(推 0.1g组织加1mL提取液),冰浴充分匀浆;8000g4℃离心 10min,取上清待测。

血清/血浆样本:血清与提取液按11体积充分混匀,8000g4℃离心10min,取上清待测。

第三步:反应孵育

在离心管中依次加入等体积的样本上清与工作液,充分混匀后密封管口(推荐使用螺旋管,或用封口膜缠绕EP管口),95℃水浴保温30min;反应结束后立即置于冰浴中冷却,随后10000g25℃离心 10min

第四步:读数检测

吸取反应上清,分别测定532nm600nm处的吸光度,记录A532A600,计算差值ΔA = A532 - A600,代入对应公式即可得到MDA含量。

五、结果计算

试剂盒针对不同样本的需求,提供了对应计算公式,核心参数统一:反应总体积0.4mLMDA-TBA加合物摩尔消光系数155×10⁻³ L/μmol/cm比色光径0.5cm

1.血清/血浆样本:MDA含量(nmol/mL=51.6×ΔA

2.组织样本(按鲜重计算):MDA含量(nmol/g鲜重)=25.8×ΔA÷样本质量(g

3.细胞/细菌样本(按细胞数计算):MDA含量(nmol/10⁴细胞)=0.0516×ΔA

4.按蛋白浓度:可配套BCA蛋白定量试剂盒,公式为MDA含量(nmol/mg prot=25.8×ΔA÷蛋白浓度(mg/mL

注:若样本经过稀释,最终结果需乘以稀释倍数。

六、实测实验数据参考

1.采用本试剂盒对常见生物样本进行检测,部分实测结果如下:

样本

质量/体积

A532

A600

ΔA

MDA含量

鸡血清

200μL

0.107

0.045

0.062

3.20 nmol/mL

紫叶李叶片

0.089g

0.182

0.043

0.139

40.29 nmol/g

桑树叶

0.200g

0.453

0.151

0.302

38.96 nmol/g

2.试剂盒配套5μg/mL MDA标准品,支持用户自行绘制标准曲线,满足更严谨的定量实验需求(如没有需求也可采用以下标曲直接进行计算)。

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七、避坑指南:注意事项

1. 工作液需完全溶解后再使用,若采用加热方式助溶,必须冷却至室温后再加样,避免温度差异影响反应体系。

2. 95℃水浴过程中务必密封管口,防止水分蒸发造成结果偏差

3. 若离心后的上清液仍浑浊,可吸取上清后再次离心,确保检测液澄清,避免杂质干扰吸光度读数。

4. 检测ΔA超出0.005~1.5范围时,需增加样本量(低于下限)或稀释样本(高于上限),保证结果处于线性范围内。

5. 样本建议新鲜制备检测,长期保存需分装后低温冻存,避免反复冻融。

八、产品信息速览

产品名称:丙二醛(MDA)含量检测试剂盒

产品规格:50T/48S100T/96S

储存条件:提取液、试剂一室温避光保存;试剂二、标准品4℃避光保存

所需设备:酶标仪/分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、96孔板/比色皿


丙二醛含量测定试剂盒


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