伊势久(江苏连云港)生物科技有限责任公司
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黄嘌呤氧化酶活性检测与黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选检测的核心区别

发布人:伊势久(江苏连云港)生物科技有限责任公司

发布日期:2026/7/13 10:54:13

黄嘌呤氧化酶(XOD)活性检测试剂盒测定意义:

黄嘌呤氧化酶(XOD,EC1.17.3.2)属需氧脱氢酶类,是活性氧主要来源之一,也是核苷酸代的关键酶之一。XOD主要分布于哺乳动物的肝脏等组织中,当肝功能受损时XOD大量释放到血清中,对肝损害的诊断具有特异性的意义。

黄嘌呤氧化酶(XOD)活性检测试剂盒测定原理:

XOD催化黄嘌呤产生尿酸,尿酸在290nm下有特征吸收峰。

黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒(WST-8法)测定意义:

黄嘌呤氧化酶(XO or XOD)是体内核酸代谢中的一种重要酶,可以催化次黄嘌呤氧化为黄嘌呤,并能进一步催化黄嘌呤氧化为尿酸,同时产生过氧化氢以及超氧化物阴离子的一系列氧化反应,在包括人类在内的一些物种中的嘌呤分解代谢中起着重要作用。在人类及其它灵长类动物中,XO通常存在于血清、肺、肝脏和肠黏膜中。在啮齿类动物中,XO在大部分组织中均有表达。血液中XO的活性通常都很低。当感染甲型流感时,血清及肺部的XO活性会增加。当肝功能受损时,XO会大量释放到血液中,因此检测血液中XO水平被作为一个评估严重肝损伤(例如黄疸)的灵敏指标。XO也可能与痛风的发病机理相关,黄嘌呤氧化酶是尿酸形成的代谢途径,因此使用黄嘌呤氧化酶抑制剂别嘌呤醇用于治疗痛风。此外,研究显示抑制XO活性可缓解心血管疾病及慢性阻塞性肺疾病。

黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒(WST-8法)测定原理:

黄嘌呤在XO催化作用下产生的超氧化物阴离子(O2·),随后与WST类指示剂(Indicator)反应产生水溶性的甲臜染料(Formazan dye)。甲臜染料在450nm左右有最大吸收峰,通过测定450nm处的吸光度就可以非常灵敏地检测黄嘌呤氧化酶活性。如果在反应中加入黄嘌呤氧化酶抑制剂(Inhibitor),甲臜染料的生成就会被抑制,甲臜的生成量与抑制剂的抑制效果成反比,这样就可以检测出抑制剂的抑制效果。

一招核心辨别:看实验核心目的

1. 测酶活性→选黄嘌呤氧化酶活性检测核心是“测样本本身”,检测生物样本(血清、组织液等)中现有XOD酶的活性高低,用于临床疾病诊断、生理状态评估,检测靶点是酶的本底活性,检测波长290nm。

2. 筛药物/抑制剂→选黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选检测核心是“测物质效果”,依托XOD酶体系,验证待测化合物是否能抑制酶活性、抑制效果强弱,用于药物研发、活性物质筛选,检测靶点是抑制剂的作用效率,检测波长450nm,灵敏度更高。

3. 核心应用场景

该检测主打靶向药物研发、活性化合物筛选、抑制剂效能评价,极少用于临床样本检测。核心应用于抗痛风、降尿酸候选药物的体外初筛与复筛,甄别天然产物、合成化合物是否具备XOD抑制活性;用于功能性食品、天然提取物的抗氧化、降尿酸活性评价;可开展抑制剂剂量效应验证,测试不同浓度待测药物的抑制率,计算IC50值,为后续细胞实验、动物体内药效实验提供数据支撑;同时适用于机制验证实验,对比新旧药物、阳性药(别嘌呤醇)的抑制效能差异。

两种检测全方位核心差异对照表

通用注意事项

简单总结:测样本、做病理、造模型用活性检测;筛药、评活性、算IC50用抑制剂筛选检测

对比维度
黄嘌呤氧化酶活性检测
黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选检测
核心实验目的
检测生物样本中固有XOD酶的活性高低
检测化合物/样品对XOD酶的抑制能力强弱
检测原理
XOD催化黄嘌呤生成尿酸,检测尿酸290nm紫外特征吸收
XOD催化产超氧阴离子,与WST显色生成甲臜染料,检测450nm吸光度变化
检测波长
290nm(紫外检测)
450nm(可见光显色,灵敏度更高)
核心适用场景
临床肝损伤诊断、动物氧化应激模型验证、体内酶活机制研究
抗痛风降尿酸药物筛选、天然产物活性评价、抑制剂IC50测定、药效对比验证
检测对象
血清、肝组织等生物样本内源性酶
外源性待测化合物、提取物、药物样品
数据输出结果
酶活性数值、酶活力单位
抑制率、剂量效应曲线、IC50值
核心实验要求
规避290nm紫外干扰,杜绝溶血、脂血样本,精准控制反应终点
统一加样条件、设置样品本底对照、即时检测显色体系、增设别嘌呤醇阳性对照
典型用途总结
测样本、判病理、验模型
筛药物、评活性、算药效




两种检测通用及专属实验注意事项

样本、试剂需现配现用,避免反复冻融导致XOD酶失活,全程低温避光操作,恒定体系pH值,避免温度、光照、酸碱波动破坏酶活性与反应平衡。实验耗材需洁净无残留,每组实验需设置空白对照与复孔,保证数据重复性与准确性。

XOD活性检测专属注意事项

本检测为290nm紫外吸收检测,体系不得含有290nm紫外吸收杂质,避免基线偏高、结果虚高。需精准控制孵育时长,防止反应不完全或非特异性氧化干扰定量结果;严格剔除溶血、脂血临床样本,避免血红蛋白、脂质干扰紫外吸光度,保障数据真实可靠。

XOD抑制剂筛选检测专属注意事项

本检测为高灵敏度WST显色体系,需统一各组加样量、加样顺序与反应条件,保证单一变量。自带颜色、氧化还原性的待测样品需设置本底对照,规避光学干扰。超氧阴离子与甲臜染料稳定性弱,显色后需立即上机检测,避免信号衰减产生误差;需增设别嘌呤醇阳性对照,校准实验体系,验证结果有效性。


在实验检测、药物筛选及临床检测场景中,多数人极易混淆黄嘌呤氧化酶活性检测黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选检测两种实验。二者虽围绕同一靶点黄嘌呤氧化酶(XOD/XO)展开,但核心目的、检测原理、应用场景完全不同。

相关试剂盒:

产品名称
货号
目录价
黄嘌呤氧化酶(XOD)检测试剂盒(分光光度法)
OX003-50T/48S
260
黄嘌呤氧化酶(XOD)检测试剂盒(分光光度法)
OX003-100T/96S
480
黄嘌呤氧化酶(XOD)检测试剂盒(微量法)
OX004-50T/48S
260
黄嘌呤氧化酶(XOD)检测试剂盒(微量法)
OX004-100T/96S
480
黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒(WST-8法)分光法
OX031-50T
480
黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒(WST-8法)微量法
OX032-100T
680

文章仅供参考,具体实验需求请查阅文献或参考相关资料,本公司产品仅供科研使用!!


伊势久(江苏连云港)生物科技有限责任公司,成立于2019年,坐落于新亚欧大陆桥东方桥头堡连云港市。公司由资深行业专家和双一流高校博士联合创办,主要从事生化检测、病理检测和原料酶等相关试剂的研发和生产。

我司位于联东U谷科技创新谷内的2000平米的生产、研发基地已建成投入运行,其中包括150平米的超十万级的洁净车间。我司坚持以自主研发为核心,现已生产出的脲酶、tRNA转运核糖核酸、刀豆球蛋白、胰蛋白酶抑制剂等产品,热销市场以来收到了客户的广泛好评。 

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