黄嘌呤氧化酶(XOD)活性检测试剂盒测定意义:
黄嘌呤氧化酶(XOD,EC1.17.3.2)属需氧脱氢酶类,是活性氧主要来源之一,也是核苷酸代谢的关键酶之一。XOD主要分布于哺乳动物的肝脏等组织中,当肝功能受损时XOD大量释放到血清中,对肝损害的诊断具有特异性的意义。
黄嘌呤氧化酶(XOD)活性检测试剂盒测定原理:
XOD催化黄嘌呤产生尿酸,尿酸在290nm下有特征吸收峰。
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发布人:伊势久(江苏连云港)生物科技有限责任公司
发布日期:2026/7/13 10:54:13
黄嘌呤氧化酶(XOD)活性检测试剂盒测定意义:
黄嘌呤氧化酶(XOD,EC1.17.3.2)属需氧脱氢酶类,是活性氧主要来源之一,也是核苷酸代谢的关键酶之一。XOD主要分布于哺乳动物的肝脏等组织中,当肝功能受损时XOD大量释放到血清中,对肝损害的诊断具有特异性的意义。
黄嘌呤氧化酶(XOD)活性检测试剂盒测定原理:
XOD催化黄嘌呤产生尿酸,尿酸在290nm下有特征吸收峰。
黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒(WST-8法)测定意义:
黄嘌呤氧化酶(XO or XOD)是体内核酸代谢中的一种重要酶,可以催化次黄嘌呤氧化为黄嘌呤,并能进一步催化黄嘌呤氧化为尿酸,同时产生过氧化氢以及超氧化物阴离子的一系列氧化反应,在包括人类在内的一些物种中的嘌呤分解代谢中起着重要作用。在人类及其它灵长类动物中,XO通常存在于血清、肺、肝脏和肠黏膜中。在啮齿类动物中,XO在大部分组织中均有表达。血液中XO的活性通常都很低。当感染甲型流感时,血清及肺部的XO活性会增加。当肝功能受损时,XO会大量释放到血液中,因此检测血液中XO水平被作为一个评估严重肝损伤(例如黄疸)的灵敏指标。XO也可能与痛风的发病机理相关,黄嘌呤氧化酶是尿酸形成的代谢途径,因此使用黄嘌呤氧化酶抑制剂别嘌呤醇用于治疗痛风。此外,研究显示抑制XO活性可缓解心血管疾病及慢性阻塞性肺疾病。
黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒(WST-8法)测定原理:
黄嘌呤在XO催化作用下产生的超氧化物阴离子(O2·–),随后与WST类指示剂(Indicator)反应产生水溶性的甲臜染料(Formazan dye)。甲臜染料在450nm左右有最大吸收峰,通过测定450nm处的吸光度就可以非常灵敏地检测黄嘌呤氧化酶活性。如果在反应中加入黄嘌呤氧化酶抑制剂(Inhibitor),甲臜染料的生成就会被抑制,甲臜的生成量与抑制剂的抑制效果成反比,这样就可以检测出抑制剂的抑制效果。
1. 测酶活性→选黄嘌呤氧化酶活性检测:核心是“测样本本身”,检测生物样本(血清、组织液等)中现有XOD酶的活性高低,用于临床疾病诊断、生理状态评估,检测靶点是酶的本底活性,检测波长290nm。
2. 筛药物/抑制剂→选黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选检测:核心是“测物质效果”,依托XOD酶体系,验证待测化合物是否能抑制酶活性、抑制效果强弱,用于药物研发、活性物质筛选,检测靶点是抑制剂的作用效率,检测波长450nm,灵敏度更高。
该检测主打靶向药物研发、活性化合物筛选、抑制剂效能评价,极少用于临床样本检测。核心应用于抗痛风、降尿酸候选药物的体外初筛与复筛,甄别天然产物、合成化合物是否具备XOD抑制活性;用于功能性食品、天然提取物的抗氧化、降尿酸活性评价;可开展抑制剂剂量效应验证,测试不同浓度待测药物的抑制率,计算IC50值,为后续细胞实验、动物体内药效实验提供数据支撑;同时适用于机制验证实验,对比新旧药物、阳性药(别嘌呤醇)的抑制效能差异。
两种检测全方位核心差异对照表
简单总结:测样本、做病理、造模型用活性检测;筛药、评活性、算IC50用抑制剂筛选检测。
两种检测通用及专属实验注意事项
样本、试剂需现配现用,避免反复冻融导致XOD酶失活,全程低温避光操作,恒定体系pH值,避免温度、光照、酸碱波动破坏酶活性与反应平衡。实验耗材需洁净无残留,每组实验需设置空白对照与复孔,保证数据重复性与准确性。
本检测为290nm紫外吸收检测,体系不得含有290nm紫外吸收杂质,避免基线偏高、结果虚高。需精准控制孵育时长,防止反应不完全或非特异性氧化干扰定量结果;严格剔除溶血、脂血临床样本,避免血红蛋白、脂质干扰紫外吸光度,保障数据真实可靠。
本检测为高灵敏度WST显色体系,需统一各组加样量、加样顺序与反应条件,保证单一变量。自带颜色、氧化还原性的待测样品需设置本底对照,规避光学干扰。超氧阴离子与甲臜染料稳定性弱,显色后需立即上机检测,避免信号衰减产生误差;需增设别嘌呤醇阳性对照,校准实验体系,验证结果有效性。
在实验检测、药物筛选及临床检测场景中,多数人极易混淆黄嘌呤氧化酶活性检测与黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选检测两种实验。二者虽围绕同一靶点黄嘌呤氧化酶(XOD/XO)展开,但核心目的、检测原理、应用场景完全不同。
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