2025V3 | 新型免疫抑制剂-他克莫司(Tacrolimus)特异性杂质稳定性研究分享

今天分享新型免疫抑制剂-他克莫司特异性杂质稳定性研究。他克莫司(Tacrolimus)，又名FK506，是从链霉菌属中分离出的发酵产物，是一种大环内酯类药物，为一种强力的新型免疫抑制剂，主要通过抑制白介素-2(IL-2)的释放，全面抑制T淋巴细胞的作用，较环孢素(CsA)强100倍。近年来，作为肝、肾移植的一线用药，已在日本、美国等14个国家上市。临床实验表明，其在心、肺、肠、骨髓等移植中应用有很好的疗效。同时FK506在治疗特应性皮炎(AD)、系统性红斑狼疮(SLE)、自身免疫性眼病等自身免疫性疾病中也发挥着积极的作用。

在本次实验中，我中心参照《欧洲药典》11.0版“TACROLIMUS MONOHYDRATE“品种项”Related substances“项下色谱条件对他克莫司的2个特定杂质进行了溶液稳定性研究，所用样品货号及结构式如下图1和图2：

图1：本次研究所用杂质货号及结构式

   图2：标准收录的杂质代码和本次研究所用杂质货号对应关系图

在本次实验中，实验员将RM-T031201(EP杂质A; Ascomycin; Tacrolimus EP Impurity A; CAS NO: 104987-12-4)和RM-T031205(EP杂质I; Tacrolimus Diene; Tacrolimus EP Impurity I; CAS NO: 104987-16-8)各取适量，分别放置在酸性、中性和碱性溶液中，分别于常温常压下放置0、3、6、12、24小时后参照《欧洲药典》11.0版“TACROLIMUS MONOHYDRATE“品种项”Related substances“项下色谱条件进样检测。观测随着样品溶液放置时间的延长，色谱图中主峰峰面积的变化，以此为根据来确定样品的溶液稳定性。

经过检测发现样品RM-T031201(EP杂质A)和RM-T031205(EP杂质I)在酸性和中性溶液中放置24小时的过程中主峰峰面积变化不大，相对标准偏差均小于2.0%。所以可以认为这两个样品在酸性和中性溶液中放置24小时的过程中是比较稳定的。但经过检测发现样品RM-T031201(EP杂质A)和RM-T031205(EP杂质I)在碱性溶液中放置24小时的过程中主峰峰面积变化较大，相对标准偏差分别为58.58%和43.19%。实验员汇总整理了两个样品在酸性、中性和碱性溶液中放置24个小时的过程中的取样检测数据，制作了样品主峰峰面积随放置时间的变化折线图及立体对比图，如下图3-图6所示。

从图3和图4可以看出，与样品RM-T031201(EP杂质A)在中性溶液中放置0小时的检测图谱相比，该样品在碱性溶液中放置0小时的检测图谱显示，主峰峰面积要小很多，而且有其他杂质存在。说明该样品在用碱性溶液配制过程中已经发生降解。而从图3中可以看出样品RM-T031201(EP杂质A)在碱性溶液中放置3小时过程中降解较快，在碱性溶液中放置3小时后，样品不再降解。从图5和图6可以看出，与样品RM-T031205(EP杂质I)在中性溶液中放置0小时的检测图谱相比，该样品在碱性溶液中放置0小时的检测图谱显示，主峰峰面积要小很多，而且有其他杂质存在。说明该样品在用碱性溶液配制过程中已经发生降解。而从图5中可以看出样品RM-T031205(EP杂质I)在碱性溶液中放置3小时过程中降解较快，在碱性溶液中放置3小时后，样品还会继续缓慢降解。

图3：样品RM-T031201(EP杂质A)在酸性、中性和碱性溶液中放置24小时的溶液稳定性数据汇总折线图

图4：样品RM-T031201(EP杂质A)的碱性溶液稳定性数据立体对比图

图5：样品RM-T031205(EP杂质I)在酸性、中性和碱性中放置24小时的溶液稳定性数据汇总折线图

图6：样品RM-T031205(EP杂质I)的碱性溶液稳定性数据立体对比图

综上所述，通过本次实验，我们发现样品RM-T031201(EP杂质A)和RM-T031205(EP杂质I)在酸性和中性溶液中稳定性都很好。以上两个样品在用碱性溶液配样过程中就会发生部分降解，并且在检测过程中还会持续降解。所以客户在检测样品RM-T031201(EP杂质A)和RM-T031205(EP杂质I)时，应避免使用碱性稀释剂，在使用、储存和运输过程中也不能碰碱。如果客户对这2个样品的稳定性内容有需要，可以向本公司咨询。