酵母高纯质粒小量快速提取试剂盒

酵母高纯质粒小量快速提取试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，并结合Lytic Enzyme特异消化酵母细胞壁，能在1 h内从酵母培养液中分离出高纯度质粒DNA。酵母收集后，加入破壁酶去除细胞壁，然后碱裂法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低PH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，最后低盐、高PH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。

酵母高纯质粒小量快速提取试剂盒的应用：获得的质粒产量高、纯度好，可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。

酵母高纯质粒小量快速提取试剂盒的推荐使用量及产量：通常酵母质粒拷贝数都很低，一般通过电泳或者分光光度计都很难检测到。提取的质粒如果用于下游试验时通常建议使用量为：1-5 μL用做PCR模板，5-10 μL用于转化大肠杆菌，选择商业化的高效率的感受态细胞。

使用酵母高纯质粒小量快速提取试剂盒注意事项：

1. 所有离心操作步骤，均在室温（15-25℃）下进行。

2.环境温度低时溶液YP2中SDS可能会析出浑浊或者沉淀，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。

3.溶液YP3和去蛋白液PE中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

4. Lytic Enzyme为蜗牛酶甘油储液，因此比较粘稠，请小心取用，-20℃保存。蜗牛酶是从蜗牛的嗦囊和消化道中制备的混合酶，它含有纤维素酶，果胶酶，淀粉酶，蛋白酶等20多种酶。适合破碎溶解各种酵母的细胞壁。

5.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧瓶盖。

6.首次使用前请先在漂洗液WB瓶中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入！ ◇ 将溶液YP3放在冰上预冷。

7.关于平衡液的使用：取一个新的硅胶膜吸附柱装在收集管中，吸取100 μL的平衡液至柱中。12,000 rpm离心1 min，倒掉收集管中废液，将吸附柱重新放回收集管，备用。平衡液在保存过程中可能有沉淀生成，请加热至37 ℃使沉淀完全消失。