SV-HUC-1

SV-HUC-1(人输尿管上皮永生化细胞)，是由猿猴空泡病毒40转染至1名11岁男孩的泌尿道上皮细胞，而建立起来的永生化细胞系。其分化特性与正常细胞相似，培养简单，可无限传代，却不属于肿瘤细胞。 1）准备F-12K培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。

2）SV-HUC-1培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3）SV-HUC-1冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

注：次传代推荐传代比例为1:2，以后传代比例可根据客户需要自己决定。

SV-HUC-1可以用于氯胺酮在膀胱上皮细胞凋亡中的作用机理研究。