人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)ELISA试剂盒

人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)ELISA试剂盒可以在体外检测样本中人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)的含量。 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)ELISA试剂盒采用双抗体夹心法测定样本中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)的水平。用已知浓度的待测物质的标准品和未知浓度的样品依次先后加入微孔板，先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，再与亲和素标记过的HRP结合，再经过彻底洗涤后，加入底物A、B，底物在HRP酶的催化下产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中待测物质的含量。

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。

4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。