L929细胞是小鼠上皮样成纤维细胞呈贴壁生长。是在1948年3月建立了NCTC clone 929(小鼠结缔组织),细胞系L的克隆。细胞系L是最早建立的连续培养细胞系之一,而clone 929是最早的克隆株。从一只100日龄的雄性C3H/An小鼠的皮下网眼状空隙和脂肪组织中建立了亲本细胞系L。第95代的细胞系L使用毛细管法分离单细胞建立了clone929。检测发现鼠痘病毒阴性。
L929细胞可用于不同浓度D-缬氨酸对小鼠成纤维细胞L929增殖和凋亡的影响研究。