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OCT-4免疫荧光试剂盒(IF)

OCT-4免疫荧光试剂盒(IF)

英文名称:OCT-4 Immunofluorescence Kit (IF)
CAS号:
分子式:
分子量:0
EINECS号:
Mol文件:Mol File
OCT-4免疫荧光试剂盒(IF) 结构式

OCT-4免疫荧光试剂盒(IF) 用途与合成方法

1.石蜡切片二甲苯脱蜡、梯度酒精水化,用PBS(pH7.4)冲洗三次,每次3分钟(3x3min)。(注意:从此步骤起,严禁标本或组织切片干燥)。

2.抗原修复(选做步骤:石蜡组织切片建议进行蛋白酶K修复20ug/ml,37℃,30min)。

3.除去PBS液,每片加50~100µl的10%山羊血清封闭液(自备),湿盒内室温或37度孵育30分钟。PBS洗涤3×2min。

4.除去PBS液,每张切片加50~100µl的Oct-4兔多抗(用户根据实验需要进行自选,用量体积按完全覆盖组织为准,建议抗体稀释比例为:固定细胞1:100-500;冰冻切片1:100-500;石蜡切片1:50-200),湿盒内室温(或37度)孵育60分钟或4℃过夜。PBS洗涤3×2min。

5.除去PBS液,每张切片加50~100µl荧光标记二抗工作液(体积用量按完全覆盖组织为准,FITC标记羊抗兔IgG,PBS稀释抗体1:50~1:200)。PBS洗涤3×2min。

6.除去PBS液,以甲醇稀释20×DAPI溶液至1×,每片加50~100µl避光染色10~15min。

7.PBS洗涤2次,以甘油明胶(60%甘油-PBS)或者防淬灭封片胶封片,在荧光显微镜下观察拍照。

OCT-4免疫荧光试剂盒(IF)可用于免疫荧光方法以显示人、大、小鼠来源的组织样本Oct-4抗原的分布。本试剂盒适用于常规福尔马林固定石蜡包埋切片、冰冻切片、培养固定的细胞爬片等。

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