NCI-H661人大细胞肺癌细胞

NCI-H661人大细胞肺癌细胞源自一43岁患有大细胞肺癌的男性白人的淋巴结。缺乏产生粘液和鳞状分化的亚显微结构和生化证据。其表达的p53 mRNA易于检测，明显高于正常肺细胞的水平，与此同时，没有出现总体性的结构DNA崎变，它们可以说明存在点突变或很小的变异。角蛋白和波形蛋白纤维染色阳性，神经丝三联体蛋白阴性。 NCI-H661细胞源自一位43岁患有大细胞肺癌白人男性的淋巴结转移病灶。NCI-H661细胞没有产生粘液和鳞状分化的亚显微结构和生化证据。NCI-H661细胞表达的p53 mRNA较高，明显高于正常肺细胞的水平，与此同时没有出现明显的DNA结构异常，说明存在点突变或很小的变异。NCI-H661细胞角蛋白和波形蛋白纤维染色阳性，神经丝三联体蛋白阴性。 1） 来源：肺癌
2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长

(一)如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换8-10ml新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1.弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。

2.加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒放于37℃培养箱1-3分钟预热，之后翻转培养瓶10-30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。

3.按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。如果没有特别说明，收到细胞后的初次传代一般是一传二。

上皮细胞样(多角形，卵圆形或梭形) 1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） 大细胞肺癌；淋巴结转移；男性；43岁 贴壁细胞