人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2

人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2属源于正常肾的近曲小管细胞，通过导入HPV-16 E6/E7基因而获得永生化。将含有HPV-16 E6/E7基因的重组的逆转录病毒载体pLXSN 16 E6/E7 转染外生包装细胞Psi-2，Psi-2细胞产生的病毒再去感染兼嗜性包装细胞系PA317，最后将PA317产生的病毒颗粒导入正常的肾皮质近曲小管细胞。尽管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性，但未用G418筛选转导克隆。Southern和FISH分析显示HK-2细胞来源于单克隆。PCR检测证实HK-2细胞基因组中含有E6/E7基因。

人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2原代取材活力≥90，产品复苏率≥60，培养两天就能清晰看到轴突与树突，培养时间可长达13-16天。

人源（Homo sapiens） 男（Male） 肾（Kidney）

人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2细胞密度达80%-90%开始传代：

（1）清洗：无菌下吸出培养基，用37 ℃预热的PBS清洗一次；

（2）消化：加1 mL 0.25%胰蛋白酶消化液，转动培养瓶令其浸润所有细胞，室温（或37 ℃）消化，显微镜下观察到细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回超净台，轻敲几下培养瓶后加1 mL 2% FBS（用D-PBS稀释）终止消化

（3）离心：用移液器轻柔吹匀后然后将悬液转移至10 mL离心管中，在1200 rpm离心3-5 min；

（4）培养：无菌下弃上清液，加1 mL完全培养基悬起细胞并移至T25培养瓶中；按1：2-1：3比例添加完全培养基，用移液器轻柔吹匀后，分装至培养瓶中，于37 ℃，5% CO2培养箱中培养。

贴壁生长（Adherent） 成人（Adult） 表皮细胞（Epithelial） 正常（Normal）