人胎儿真皮成纤维细胞

成纤维细胞是疏松结缔组织中最常见而且数量较多的一种细胞，位于胶原纤维近旁并依附于其上。此细胞的形态结构可随其功能状态的不同而改变。在功能活动旺盛时，成纤维细胞的胞体较大，呈扁平星形，有突起。胞核呈卵圆形，核染色质较少，着色浅，核仁明显。胞质较多，弱硷性，内含丰富的粗面内质网、核蛋白体、高尔基复合体以及微丝和微管等结构，表明此种细胞具有合成和分泌胶原蛋白、弹性蛋白和多糖蛋白，形成胶原纤维、弹性纤维、网状纤维和基质的作用。在相对静止或功能活动不活跃时的细胞，称为纤维细胞。这种细胞比成纤维细胞小，轮廓不甚清楚，多呈梭形。胞质少，弱嗜酸性，其中粗面内质网、高尔基复合体及其它细胞器均不发达。 室温下45多聚甲醛固定细胞3min，含5%牛血清白蛋白的洗2次，固定细胞在1：100鼠抗人成纤维细胞抗体中，4℃孵育16小时。鼠IgG代替一抗作为阴性对照。用PBS将细胞洗3次，加人1：100抗鼠一室温下孵育60min。PBS洗3次，每次5min。抗荧光衰减剂封片，在荧光显微镜下观察，并与同视野下光镜对照。 随机选取5个视野，分别计数荧光阳性细胞数和明场总细胞数的比值，作为纯度指标。