DH10BAC Competent Cell 用途与合成方法
-70℃保存,避免反复冻融。
DH10Bac细胞包含亲本Bacmid bMON14272和辅助质粒pMON7124.亲本Bacmid包含一个mini-F复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7位点和lac Zα-互补因子。辅助质粒包含tns ABCD区域,该区域提供了mini-Tn7从供体质粒插入亲本Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如pFastBac系列质粒(pFastBac1,pFastBacDual等)含有Tn7R和Tn7L同源重组臂,Tn7R和Tn7L之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和SV40病毒的PolyA加尾信号。当含有靶基因pFastBac的重组质粒转化到DH10Bac细胞后,发生重组后就可产生重组Bacmid,提取纯化重组Bacmid转染昆虫细胞Sf9或Sf21就可以包装产生昆虫病毒。此外,DH10Bac细胞中的The φ80dlacZΔM15基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象,用于重组bacmid的蓝白斑筛选。
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2020-02-12
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上海泽叶生物科技有限公司
2024-12-18