N-[芴甲氧羰基]-L-缬氨酰-L-丙氨酸

N-[芴甲氧羰基]-L-缬氨酰-L-丙氨酸是ADC 领域经典可裂解型多肽连接子，化学名称为(S)-2-((S)-2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-甲基丁酰胺基)丙酸，常温下为白色至类白色固体粉末，分子由马来酰亚胺己酰基（MC）、酶敏感二肽 Val‑Cit、自降解间隔臂 PABC 构成，可溶于 DMSO、DMF，微溶于水，用于抗体巯基偶联，是多款上市 ADC 药物的核心中间体。

N-[芴甲氧羰基]-L-缬氨酰-L-丙氨酸依靠 Val‑Cit 序列被肿瘤细胞内组织蛋白酶 B 特异性剪切，PABC 片段发生自降解，精准释放偶联的细胞毒素；在血液循环中稳定性高、脱靶释放少，可显著提升 ADC 的靶向性与治疗窗口，广泛用于抗肿瘤抗体药物偶联物的结构设计与研发。

1115-74-8

28920-43-6

150114-97-9

以化合物（CAS:1115-74-8）和氯甲酸-9-芴基甲酯为原料合成N-[芴甲氧羰基]-L-缬氨酰-L-丙氨酸的一般步骤如下： (a) 将(R)-2-((R)-2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-甲基丁酰丙酸（20a，350 mg，1.86 mmol）和Na2CO3（493 mg，4.65 mmol）溶于蒸馏水（15 mL）中，并将混合物冷却至0℃。随后加入二恶烷（15 mL）（部分沉淀出现）。在10分钟内，剧烈搅拌下滴加Fmoc-Cl（504 mg，1.95 mmol）的二恶烷（15 mL）溶液。将得到的混合物在0℃下搅拌2小时。 除去冰浴后，继续搅拌16小时。通过减压旋转蒸发除去溶剂，将残余物溶于水（150 mL）中。用1N HCl水溶液将pH从9调节至2。随后用EtOAc（3×100 mL）萃取水层。合并有机层，用盐水（100 mL）洗涤，用MgSO4干燥，过滤后通过减压旋转蒸发除去挥发物，得到纯的HO-Ala-Val-Fmoc（20b，746 mg，收率97%）。 LC/MS分析：2.85分钟（ES+）m/z（相对强度）410.60。 1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ 7.79（d，J = 7.77 Hz，2H），7.60（d，J = 7.77 Hz，2H），7.43（d，J = 7.5 Hz，2H），7.34（d，J = 7.5 Hz，2H），6.30（bs，1H），5.30（bs，1H），4.71-7.56（m，1H），4.54-4.36（m，2H），4.08-3.91（m，1H），2.21-2.07（m，1H），1.50（d，J = 1AHz，3H），1.06-0.90（m，6H）。

参考文献：

[1] Patent: WO2014/57073, 2014, A1. Location in patent: Page/Page column 123; 124

[2] Patent: WO2014/57072, 2014, A1. Location in patent: Page/Page column 43

[3] Patent: WO2014/96365, 2014, A1. Location in patent: Page/Page column 200-201

[4] Patent: WO2014/130879, 2014, A2. Location in patent: Page/Page column 124; 125

[5] Patent: WO2015/52533, 2015, A1. Location in patent: Page/Page column 47; 48