A-549人肺癌贴壁细胞系 用途与合成方法
1972年，A-549人肺癌贴壁细胞系由D.J. Giard等人通过肺癌组织移植培养建系，源自一位58岁白人男性的肺腺癌组织。
A549细胞能够通过胞苷二磷酸胆碱途径合成含有高含量不饱和脂肪酸的卵磷脂。
人肺癌细胞复苏：
1）配制完全培养基：基础培养基+胎牛血清+双抗（特殊培养基特殊配置）；
2）人肺癌细胞复苏：取5ml完全培养基于15ml离心管中，37℃水浴锅预热，从液氮管（或者-80度冰箱）中快速取出冻存的细胞，放入37℃水浴锅中，摇晃使快速化冻（1min左右），然后将化冻的细胞和预热的培养基，移入超净工作台中，化冻的细胞加入到含预热培养基的15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3）吸弃上清，得到细胞沉淀，用2ml完全培养基轻轻重悬细胞，加入到T25培养瓶中，做好标记，放入37℃，5%CO2饱和适度培养箱中培养（培养皿复苏效果更好）；
4）24h后，观察细胞贴壁情况（未贴壁的即为死细胞--针对贴壁细胞），吸弃旧培养基，加入新鲜的预热（室温或37℃）的完全培养基，继续培养。
A-549人肺癌贴壁细胞系可用于测试抗癌药物的疗效和毒性，研究肺癌细胞的增殖、分化、侵袭和转移机制，用于开发和测试新的靶向治疗和免疫治疗方法。
人，白人 男性，51岁 肺 90% F12K+10% FBS 贴壁生长（Adherent） 58 岁（58 years） 贴壁生长1）待人肺癌细胞生长到80%-90%汇合度时，吸弃旧的培养基，加入1ml无菌PBS润洗一次，以去除残余的培养基及血清（血清含有胰酶的抑制因子），然后加入1ml 0.25%胰酶，37℃培养箱中消化（1~2min左右，不同细胞消化时间不同），取出细胞，镜下观察细胞至细胞皱缩变圆；
2）加入1ml完全培养基（含FBS）终止消化，轻轻拍打，使细胞脱落下来成单个细胞悬液，收集细胞于15ml无菌离心管中，1000rpm，离心5min；
3）收集人肺癌细胞沉淀，完全培养基重悬，一分为二（可根据细胞生长速度调整比例），分别加入到2个新的培养瓶中，做好标记，放入培养箱中培养。
癌症（Carcinoma）1）按照人肺癌细胞传代方法，在超净工作台内消化收集细胞沉淀，取少量细胞用于计数；
2）用预冷的1ml冻存液（90%完全培养基+10%DMSO）或者无血清细胞冻存液重悬细胞，加入到1.2ml冻存管中，密度为1*106个/ml。
3）放入程序冻存盒，-80℃过夜后，转入液氮长期保存。
