5%BSA封闭液 用途与合成方法
5% BSA封闭液是一种常用的实验试剂,主要用于免疫荧光、Western Blot、ELISA等实验中封闭非特异性结合位点,以降低背景信号。
称量BSA:准确称取5克牛血清白蛋白(BSA)。
溶解:将称好的BSA加入到95毫升的PBS(磷酸盐缓冲液)或TBS(Tris缓冲液)中。
定容:将上述溶液定容至100毫升,使BSA的最终浓度为5%。
搅拌溶解:搅拌至BSA完全溶解。
过滤除菌(可选):如果需要无菌操作,可以使用0.22微米滤膜进行过滤除菌。
保存:将配好的5% BSA封闭液置于4℃冰箱保存。
封闭时间:一般室温封闭30分钟至1小时即可。对于一些背景非常高的抗体,可以4℃封闭过夜。
操作步骤:在实验中,将样品或固相载体(如96孔板、PVDF膜等)加入足够的5% BSA封闭液,确保完全覆盖表面,然后进行孵育。
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