C-33 A(人子宫颈癌细胞) 用途与合成方法
C-33 A细胞是由N·Auersperg从宫颈癌切片中建立的一系列细胞株中的一株。C-33 A细胞一开始就表现出亚二倍体核型及上皮细胞形态,C-33 A细胞经连续传代可以观察到核型不稳定。C-33 A细胞存在成视网膜细胞瘤蛋白(pRB),但大小不正常;C-33 A细胞p53表达上调,且有一个273位密码子的点突变导致Arg→Cys的替换。 宫颈癌细胞 细胞内存在成视网膜细胞瘤蛋白(pRB),但大小不正常;P53表达上调,第273位密码子突变,从而导致Arg氨基酸替换为Cys,经检测发现人乳头瘤病毒(HPV)DNA及RNA阴性。 复苏人子宫颈癌细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL*培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 人源(Homo sapiens) 宫颈(Cervix) 贴壁生长(Adherent) 66 岁(66 years) 表皮细胞(Epithelial) 肿瘤细胞
人子宫颈癌细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1、对于贴壁人子宫颈癌细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的*培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,*脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
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