SNU-398人肝癌贴壁细胞系

1990年，Park JG及其同事从韩国原发性肝癌肿瘤患者中建立8株人肝癌细胞系。SNU-398是其中的1株肝癌细胞，所对应的患者曾接受经导管动脉栓塞术，并使用类脂醇加多柔比星和丝裂霉素-C组合治疗。该细胞最初在添加了5% 热灭活胎牛血清的ACL-4培养基中培养，建系成功后使用添加10%胎牛血清的RPMI 1640培养基进行培养，培养时会不断在胞质中产生透明小体，并有多个核仁。有报道用Southern印迹杂交法检测到乙型肝炎病毒（HBV）DNA，但HBV 基因组 RNA 没有表达。
SNU-398细胞专用培养基可保持SNU-398细胞最佳的生长状态。本产品中已包含SNU-398细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于SNU-398细胞的体外培养。本产品仅供进一步科研使用，不得用于诊断、治疗、临床、家庭及其它用途。 SNU398细胞于1990年由J.-G. Park和同事取自一名42岁韩国患者的间变性肝细胞癌，该患者接受了脂质偶像加阿霉素和丝裂霉素C联合的经导管动脉栓塞治疗。肿瘤细胞最初在补充有5%热灭活胎牛血清的ACL-4培养基中培养，建立后细胞系后将培养物保持在补充有10%热灭活胎牛血清的RPMI 1640中。大体上，原发肿瘤为单发结节，结节周围延伸，组织学上为小梁型。SNU398细胞是多核的，并维持原肿瘤细胞一样的浆内透明球的产生。用Southern印迹杂交检测到SNU398细胞中乙型肝炎病毒（HBV）DNA，HBV基因组RNA未表达。SNU398细胞可以用于3D细胞培养、癌症研究、传染病研究、性传播疾病研究。 1） 来源：人，肝组织
2） 形态：上皮样，多数贴壁少量悬浮， 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） 人，亚洲人 男性，42岁 肝脏 90%RPMI-1640+10%FBS 贴壁生长（Adherent） 42 岁（42 years） 贴壁和悬浮细胞共存

SNU-398人肝癌贴壁细胞系培养基及培养冻存条件准备：

1）准备1640培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。

注：上皮样细胞，多数贴壁，悬浮细胞和贴壁细胞同时存在。传代冻存时请收集悬浮细胞。

2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

SNU-398人肝癌贴壁细胞系细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4.将细胞悬液按1：2比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma）