细胞复苏 细胞传代 细胞冻存

SNU-398人肝癌贴壁细胞系

SNU-398人肝癌贴壁细胞系,,结构式
SNU-398人肝癌贴壁细胞系
  • CAS号:
  • 英文名:SNU-398
  • 中文名:SNU-398人肝癌贴壁细胞系
  • CBNumber:CB15856102
  • 分子式:
  • 分子量:0
  • MOL File:Mol file

SNU-398人肝癌贴壁细胞系性质、用途与生产工艺

  • 细胞复苏 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
  • 细胞传代

    SNU-398人肝癌贴壁细胞系细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

    1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

    2.加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

    3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

    4.将细胞悬液按1:2比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

  • 细胞冻存

    SNU-398人肝癌贴壁细胞系培养基及培养冻存条件准备:

    1)准备1640培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

    注:上皮样细胞,多数贴壁,悬浮细胞和贴壁细胞同时存在。传代冻存时请收集悬浮细胞。

    2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

    3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

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